1.2 方法

    1.2.1 原代小鼠皮层神经元培养及各组神经元处理 取胎龄为13～15 d 的小鼠，无菌条件下分离出大脑皮层，在D-Hank′s 平衡盐溶液中漂洗3次，尽量剔除脑膜，剪碎后用终浓度为0.25%胰酶，37℃消化10 min，离心，弃上清，用含15%胎牛血清的DMEM 培养基制备成1.0×109/L密度的细胞悬液，接种于预先用L-多聚赖氨酸包被的培养板中，置37℃、5% CO2培养箱内孵育。24 h后换成含2% B27的Neurobasal 继续培养，隔天换液。培养至第7天，换液，KCl组为终浓度为0.1 mol/L KCl 作用12 h，M-β-CD -KCl组为0.002 mol/L M-β-CD预处理25 min 后加入KCl，终浓度为0.1 mol/L，作用12 h。然后，将各组细胞用于后续实验。

    1.2.2 荧光显微镜观察各组神经元胞内钙离子荧光强度的变化

    用D-hanks液洗涤细胞3次，加入终浓度为5 μmol/L的Fluo-3/AM-DMSO D-hanks液， 在37℃孵育45 min，用D-hanks液洗涤细胞5次 ......