1.2.2 FISH方法检测HER-2基因扩增 将免疫组化结果中出现强阳性标本病例(+++)及部分中等阳性(++)病例采用FISH方法进行HER-2基因擴增检测。①切片预处理：取3 μm 厚乳腺癌组织石蜡切片，分别置于涂多聚赖酸载玻片上，置于68℃下过夜烘烤。室温下组织切片常规脱蜡至去离子水；50℃用30%[w/v] 酸性亚硫酸钠处理组织切片30 min。2×SSC 溶液中(pH=7.0) 漂洗5 min×2；37℃下取0.40 mL蛋白酶K 储存液(20 mg/mL) 溶于40 mL 2×SSC(pH=7.0)得到蛋白酶K工作液(200 μg/mL) ； 将组织切片浸泡在蛋白酶K 工作液中消化；2×SSC 溶液中漂洗5 min×2； 依次置于-20℃预冷的70%乙醇、85%乙醇和100%乙醇中各2 min 脱水； 室温浸入丙酮溶液中2 min，自然干燥玻片；加热玻片至56℃。②探针与样本杂交及洗脱暗处将变性后的探针混合物滴于玻片上组织中央，立即加盖盖玻片，避免盖玻片与组织之间产生气泡；用橡皮胶封边；将玻片置于自动杂交仪，83℃6 min，37℃中杂交16～20 h。移去盖玻片，在46℃水浴箱中依次置于50%甲酰胺/2×SSC 溶液10 min×3 ......