1.2 方法

    动物模型制备，在饲养过程中，需要借助高糖饲料进行饲养，同时进行链尿佐菌素滴注，使用剂量控制在60 mg/kg，促使本组大鼠成为糖尿病大鼠。进行该次研究时，采集两组大鼠血液进行测定可知，两组大鼠空腹血糖浓度均在16.6 mmol/l以上。随后，对照组大鼠按照常规方式继续进行喂养。而观察组则需要使用罗格列酮(国药准字H20061297)，使用剂量为2 mg/kg，喂养3次/d。持续进行14 d喂养后，对两组大鼠双侧颞骨进行获取。随后，在咬骨钳的作用下，将颞骨多余骨质进行去除。并借助乙二胺四乙酸二钠进行脱钙处理。大约10 d后，按照免疫组化常规流程针对内耳组织样本进行制定。借由90%乙醇进行约2 h浸泡，然后借助对应模具顺着耳蜗轴水平的位置进行包埋。在显微镜的作用下进行切片，厚度控制在6 mm左右，并用30%酒精展开漂洗，将其放置在温水中展开，附着在涂抹有聚萘氨酸玻片上。待12 h后，将切片借助PBS进行冲洗。待上述操作完成后，借助常规DAB显色试剂盒对切片进行染色，染色6 min左右，进行冲洗。最后，借助苏木素进行复染，达到对细胞核进行染色的效果，依次进行脱水、透明以及封片操作。随后借助高倍显微镜，针对两组切片中VEGF、ICAM-1水平进行测定。该次切片观察工作由该院具备多年临床经验医师2名共同进行，以保障该计数结果的准确性。

    1.3 观察指标

    在该次研究中侧重需要对两组大鼠内耳组织切片VEGF、ICAM-1水平展開统计[5] ......