乳鼠心肌细胞原代培养方法的再改良
DOI:10.16662/j.cnki.1674-0742.2018.33.029[摘要] 目的 探求优化的原代培养乳鼠心肌细胞方法。 方法 2017年6月1日—2017年6月2日选取泉州市医学高等专科学校提供6只出生24 h内Wistar乳鼠,采用2种不同消化心肌组织的方法,对照组予0.125%胰酶+0.05%I型胶原酶+0.1%Ⅱ型胶原酶逐次消化心肌组织;试验组予0.05%I型胶原酶+0.1%Ⅱ型胶原酶消化数次后再单予 0.125%胰酶快速消化心肌组织;比较两组取得的心肌细胞数量以及存活率,免疫荧光测肌钙蛋白鉴定纯度。 结果 2种方法均得到心肌细胞数量多[对照组(103.3±4.4),试验组(105.8±5.0)],差异无统计学意义(t=-0.911,P=0.384);细胞即刻存活率试验组明显高于对照组,试验组达91.87%,对照组即刻存活率仅68.07%,差异有统计学意义(χ2=81.0,P=0.025)。试验组存活率明显高于对照组。结论 再改良方法提取心肌细胞,可获得存活率高、活力好的心肌细胞。
[关键词] 心肌细胞;原代培养;乳鼠
[中图分类号] R813.11 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742(2018)11(c)-0029-03
乳鼠心肌细胞培养技术已广泛应用于心血管疾病防治研究领域,其培养技术备受关注[1]。这一技术关键是如何获得收获率高、存活率高、纯度高且生长活力好的心肌细胞。近40多年来国内外诸多学者对乳鼠心肌细胞的培养方法作了多次的改进,但影响心肌细胞培养结果的因素较多,使得心肌细胞培养的收获率、存活率及活力难以稳定,参差不齐。因此该文在既往研究方法[2]基础上于2017年6月1日—2017年6月2日选择6只出生24 h内Wistar乳鼠进行心肌细胞原代培养的再改良 ......
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