基于CRISPR/Cas9构建小鼠UOX基因敲除模型(3)
该研究两细胞胚率为81.7%(58/71),显微注射了Cas9 蛋白和UOX-sgRNA的胚胎移植至58个两细胞胚。将50个囊胚移植到2只代孕母鼠子宫,2只均怀孕,共生产17 只小鼠,出生率为34.0%(17/50)。F0代小鼠外观正常,健康状态良好,均无外伤或感染发生。3.2 UOX—小鼠鉴定结果
sgRNA转录模板经扩增后琼脂糖凝胶电泳检测,目的条带消失(图1),F0代小鼠鼠尾DNA测序结果显示,其中8只小鼠的 UOX基因被敲除,突变率为47.06%。突变小鼠的测序图见图2。8只UOX—小鼠与未突变小鼠外观无差异。
4 讨论
高尿酸血症约80%源于内源性尿酸代谢紊乱[3]。高尿酸血症患者体内嘌呤单钠尿酸盐(purine monosodium urate,MSU)在关节异常累积,会引起痛风。痛风严重影响患者生存质量,会导致痛风石沉积、关节炎反复发作和关节畸变[4]。据报道,中国成年人群痛风的校正患病率达 8.4%[5] ......
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