刘娜，姜丽波，张淑英，周虹，曲延章，姚宇宁，许玲玲，周畅

    齐齐哈尔医学院附属第二医院血液科，黑龙江齐齐哈尔161000

    再生障碍性贫血(aplastic anemia，AA)是一种骨髓造血衰竭综合征，以骨髓造血细胞增生减低和外周血全血细胞减少为特征，在临床上表现为不同程度的三系血细胞减少所致的贫血、出血和感染等[1-2]。有关AA的“免疫介导”发病机制,国内外均认为细胞免疫异常在其发病中起重要作用[3]，因此AA实质上是以骨髓组织为靶器官的T细胞免疫异常介导的疾病[4-5]。早期研究发现CD4+CD25+调节性T细胞 (regulatory T cell，Tregs)持续表达在机体免疫抑制反应和免疫耐受状态方面起重要作用[6-7]。Foxp3是转录因子叉头样/翼状螺旋家族成员，是Treg最具有特征性的分子标志，对Treg细胞发育成熟和功能完善发挥重要作用，同时在维持免疫耐受中起重要作用[8-9]。因此，目前关于Treg细胞在AA诊断方面的研究报道很多[10-13]，但是，针对Treg细胞在不同亚群AA之间的分布及差异的报道还不是很多。因此，该研究主要探讨2017年1月—2019年1月期间初诊的急性再生障碍性贫血(SAA)和慢性再生障碍性贫血(CAA)共40例患者外周血中CD4+、CD25+和Foxp3+Treg细胞亚群变化情况及相关基因表达情况，评价其在AA诊断中的应用价值。现报道如下。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料

    方便选取该院血液科收治的初发AA患者40例，平均年龄(55.42±22.7)岁；男性17例，女性23例。根据《中国再生障碍性贫血的诊断和治疗专家共识》(2017)诊断及分类标准将患者分为CAA患者18例，男8例，女10例。SAA患者22例，男9例，女13例。同时选择健康体检20名正常人作为对照组(CN)，平均年龄为(58.36±17.2)岁；男8名，女12名。3组一般资料对比，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。所有患者知情同意该次研究。

    1.2 方法

    所有受试者均清晨空腹收集血样。所有样本被放置在正常空白采血管内4℃条件下储存2～3 h,然后3 000 r/min离心20 min。收集血清样本，并在-80℃冷冻后进行进一步检测。该研究所有受试者均签署知情同意书并由齐齐哈尔医学院伦理委员会批准。

    1.3 主要试剂及仪器

    荧光标记的抗体：Anti-Human Foxp3 Staining Kit-Alexa Fluor 647,Foxp3(259D/C7),CD4(RPA-T4),CD25(M-A251) ......