李永涛，沈雷，张善强，姜杨，孙石柱

    齐齐哈尔医学院基础医学院解剖教研室，黑龙江齐齐哈尔 161006

    糖尿病患者全球约4.51亿人[1]，我国糖尿病患发病率保守估计约为11%[2]。控制糖尿病及其并发症却不理想。间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)作为细胞治疗的首选细胞被用于多种疾病的治疗[3-5]。提高MSC归巢效率将促进MSC的再生修复能力。B淋巴细胞化学引诱物-1(b-lymphocyte chemical attractants-1，BCA-1)又称趋化因子13(CXC motif chemokine ligand 13,CXCL-13)，不仅作为判断肝癌预后的良好指标[6]，还可以激活CXCR5/ERK信号通路而加速乳腺癌细胞转移[7]。CXCL-13可以降低癌细胞免疫原性，在肿瘤免疫逃避中发挥作用[8]。此外发现MSC分泌的CXCL-13可促进骨髓瘤细胞侵袭，增加耐药性[9]。也有研究发现，BCA-1结合于MSC的CXCR5受体，诱导MSC成骨分化、成肌腱分化，在肌腱-骨愈合过程中发挥再生修复作用[10-11]。缺氧环境下，BCA-1通过MAPK/NFκB信号通路促进MSC自噬和增殖[12]。因此，BCA-1可能在招募MSC迁移或降低MSC低免疫原性等“干性”作用中发挥着重要作用。

    MSC由血管迁移到组织是MSC穿过血管的过程，目前还不清楚BCA-1招募MSC归巢与血管平滑肌细胞的关系。该研究在细胞高糖模型下，以BCA-1刺激主动脉平滑肌细胞(aortic smooth muscle cells，ASMC)的上清液制备条件培养基，观察各组ASMC对MSC增殖和凋亡作用及分子机制，为BCA-1诱导MSC归巢穿越血管壁，治疗糖尿病及其并发症提供研究数据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    小鼠主动脉平滑肌细胞(mASMC)、小鼠骨髓间充质干细胞(mBMSC)均购自深圳豪地华拓生物科技有限公司；小鼠BCA-1重组蛋白购自武汉艾美捷科技有限公司；LY294002重组蛋白购自美国Selleck公司；胎牛血清(Fetal Bovine Serum，FBS)、α-MEM培养基、RPMI-1640培养基均购自美国Hyclone公司；Annexin VFITC/PI细胞凋亡试剂盒购自南京凯基生物科技发展有限公司；CCK-8购自日本Dojindo公司；苯甲基磺酰氟(Phenylmethylsulfonyl fluoride，PMSF)购自上海碧云天生物技术有限公司；小鼠IL-8、Akt、磷酸化-Akt(Phosphorylation-Akt,p-Akt)蛋白的ELISA试剂盒购自美国R&D公司 ......