胡 意 ，郭 菲 ，娄远蕾 ，缪丽芳 ，陆 丹 ，汪 泱

    (1、南昌大学第一附属医院检验科；2、烧伤研究所；3、泌外研究所；4、南昌大学研究生院，江西 南昌 330006)

    由于细菌感染、烧伤或创伤等因素可引起脂多糖(Lipopolysaccharide，LPS)进入血液，激活单核细胞、巨噬细胞，促使其释放过量肿瘤坏死因子(TNF-α)、白细胞介素类及NO等多种炎性介质，进而造成肝、肺、心脏、肾等组织和器官的损伤，导致多脏器功能不全综合征 (multiple organ dysfunction syndrome,MODS)[1]。而Ca2+作为第二信使，在LPS的活化过程中，具有重要的信号传导作用。Ca2+能够传递外界刺激的信号，启动基因转录，促使细胞分泌大量的炎性细胞因子[2]。本课题小组前期研究表明镧具有结合LPS降低内毒素毒性的作用，减轻内毒素对机体造成的损伤[3,4]，且一定浓度氯化镧(LaCl3)可显著抑制LPS诱导小鼠巨噬细胞产生NO[5]。随着对稀土化合物生物效应研究的深入，稀土化合物发挥生物效应的分子机制已成为学者日益关注的课题。本研究探讨LaCl3对LPS诱导巨噬细胞钙信号通路激活及其释放TNF-α的影响。

    材料与方法

    1 材料 氯化镧(LaCl3·7H2O，纯度99.9%，Sigma，美 国 )、LPS (Ecoli.serotype O55B5；Sigma， 美 国 )、DMEM/F12 液体培养基 (LPS<0.03μmol/ml，Hyclon，美国) 和胎牛血清(LPS<0.03μmol/ml，Gibco，美国)、流式细胞仪 (Becton Dickinson， 美国)、CO2培养箱(Forma， 美国)、TNF-α ELISA 试剂盒 (Diaclone，法国)，Fluo-3/AM(Molecular Probes，美国)。

    2方法

    2.1 器材的准备、灭菌、去热原处理 所用玻璃器具均经硫酸清洁液浸泡，充分洗涤后于250℃干热消毒4h。所用塑料制品清洗干净后用30%双氧水浸泡4h，用三蒸水冲洗后于60℃烘干，再于120℃高压灭菌 ......