江 梅综述，万腊根审校

    (南昌大学第一附属医院检验科，江西 南昌 330006)

    实时荧光定量PCR技术 (real time quantitative PCR，RQ-PCR)是由美国ABI公司于1995年研发用于核酸定量检测技术，目前该技术在科研和临床上已得到了广泛的应用，也为白血病的分子生物学研究提供了新的手段，已有很多临床血液病学家和检验学家应用该技术在白血病融合基因检测及其临床应用进行了大量的研究报道，本文拟就国内外的相关研究报道对检测白血病融合基因的RQ-PCR技术作一综述。

    1 白血病融合基因

    多数白血病患者具有特异性染色体异常：如急性早幼粒细胞白血病 (APL)、慢性粒细胞白血病(CML)等，由于染色体易位、倒位等变异，使得基因结构重排而产生融合基因，而成为白血病特异性的分子标志，因此对融合基因的检测可用于白血病的分子生物学分型诊断、预后观察及微残留病灶(MRD)的诊断，目前常见于临床的白血病融合基因有以下几种[1-2]。

    1.1 bcr-abl融合基因：是由 t(9；22)(q34；q11)，使9q34上的原癌基因abl与22q11上的bcr基因合并形成bcr-abl融合基因，并转录产生8.5kb的融合mRNA。染色体易位时abl基因的断裂点位于第二外显子 (a2)(实际是从第1内含子到第2内含子间>100kb的区域)，断裂点相对比较固定，bcr基因的断裂点有三个，在CML集中于中部第12～15外显子和相应内含子长约5.8kb的M-bcr区，且主要在第13(b2)和第14(b3)外显子断裂形成b2a2和b3a2亚型；第三个断裂点位于第1内含子中2个较小的bcr-1或bcr-2区形成m-bcr/abl融合基因 (e1a2亚型)，b2a2，b3a2和 e1a2分别编码 P210、P210和 P190蛋白，文献[3]报道 100%CML病人检出 bcr/abl，因此bcr-abl融合基因检测可用于CML的分子诊断。

    1.2 PML-RARa融合基因：是由于 t(15，17)(q22；q22)染色体易位，使17号染色体上的RARa基因与位于15号染色体上的PML基因融合后形成的PML-RARa融合基因，PARa仅一个断裂点位于2号内含子，PML基因有3个断裂点，分别位于6号外显子、6号内含子和3号内含子，形成Long(55%)、Varint(5%)和 Short(40%)三个亚型。PML-RARa融合基因是APL的特异性分子标志，见于98%的APL病人[3]。因此PML-RARa基因检测可用于APL分子诊断 ......