王 建，张功亮，肖军兰，郭广秀，黄金长，湛 曦，曾金林

    (江西省赣州市人民医院病理科，江西 赣州 341000)

    生物治疗已成为21世纪肿瘤治疗的主要方向和潮流，更好地将生物治疗和其他治疗手段结合，提高治疗效果和改善生存质量，无疑将有助于生物治疗在肿瘤综合治疗中发挥重要作用。利用显色原位杂交(CISH)技术检测原发性乳腺癌组织中HER-2/neu的基因表达状态，对于分析其临床意义、指导临床用药等具有重要意义。

    1 材料与方法

    1.1 一般资料 我院2006年1月～2010年6月期间收治的经手术根治切除并经术后病理证实的216例乳腺浸润性导管癌组织标本。患者均为女性，年龄30～73岁，平均48±7.15岁。全部病例术前均未行化疗或放疗。标本均先行免疫组化(IHC)检测后，再进一步行显色原位杂交(CISH)检测。所有标本均同时进行雌激素(ER)、孕激素(PR)表达的检测。

    1.2 检测方法

    1.2.1 IHC检测方法 试剂：迈新公司KIT5020试剂盒，操作流程按说明书进行，TBS代替一抗作为阴性对照。

    1.2.2 CISH检测方法 收集并保存乳腺浸润性导管癌石蜡标本；石蜡切片厚 4μm，60℃烤片 2～4h，脱蜡，水化，加热预处理液煮沸20min，胃蛋白酶消化20min，脱水，晾干，每片滴加10μl的探针，杂交膜封片，原位PCR仪共变性5min，37℃温盒孵育过夜，0.5×SSC 75℃洗涤 5min，滴加鼠抗 DIG抗体，室温孵育30min ......