环境空气中尼古丁的高效液相色谱测定方法
采样器,庚烷,材料与方法,结果,1尼古丁标准曲线,2尼古丁工作曲线,3检出限及测定下限,4精密度测试,5准确度的测试,6样品稳定性实验,7解吸效率测试实验,讨论
刘小玲,周 鸿,于 晖,谭洪涛(江西省疾病预防控制中心,江西 南昌 330029)
环境空气中尼古丁的高效液相色谱测定方法
刘小玲,周 鸿,于 晖,谭洪涛
(江西省疾病预防控制中心,江西 南昌 330029)
目的建立高效液相色谱(HPLC)测定环境空气中尼古丁的方法。方法样品通过反相C18柱(150×4.6mm)分离,采用磷酸二氢钾-乙腈溶液为流动相(流速为1ml/min,采用等度洗脱),通过紫外检测器检测(波长为260nm)。结果该方法标准曲线的相关系数为 0.99993,工作曲线的相关系数为 0.9995,检出限为 4.03×10-3μg/ml,测定下限为 3.12×10-2μg/ml,对低、中、高 3浓度尼古丁加标回收率为87.4%、88.5%、90.8%,对低、中、高3浓度尼古丁测定的相对标准偏差分别为0.88%、0.52%、1.1%,对低、中、高3浓度尼古丁的解吸率测定分别为92.3%、94.3%、94.6%,以及采样器中样品稳定性实验,表明11d内样品均稳定。结论该方法灵敏度高,重现性好,操作简便,仪器易普及。
高效液相色谱;环境空气中尼古丁;检测
目前,国内外尼古丁的测定方法[1-3]有很多种,例如可以采用 LC-MS、LC-MS-MS[4]、GC-MS[5]的方法,但由于这些方法中仪器较昂贵,仪器保有量很低,无法在基层单位推广。由于用高效液相色谱检测尼古丁的方法具有灵敏度高,重现性好,且仪器易普及的特点,适用于实验室推广使用。因为本方法不仅可以监测环境空气中尼古丁的浓度,还可以测定人体生物样品如尿液[6]、唾液[7]和头发[8]中的尼古丁含量,从而可以比较准确地评价人群的暴露水平,为制订科学的控烟措施及评价控烟效果提供技术支持。
材料与方法
1 方法原理 环境中气态尼古丁采用被动式采样器采样,采样后将4%NaHSO4-5%甘油溶液浸渍的玻璃纤维滤膜经氢氧化钠洗脱和正庚烷萃取,在萃取液中加盐酸混匀,用氮吹仪吹至近干,用1ml流动相定容。使用C18反相色谱柱分离,紫外检测器检测,检测波长为260nm,以保留时间定性,以峰面积定量。
2 实验仪器、材料和试剂
2.1 实验仪器和材料 LC-20A型高效液相色谱仪,快速混匀器,超声波清洗器,TTL-DCⅡ型氮吹仪,玻璃纤维滤膜(d=42mm),被动式采样壳体(由中疾控提供),10μl和 50μl微型注射器,1.5ml样品瓶
2.3 实验试剂 尼古丁(标准品),磷酸二氢钾(分析纯) ......
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