CTGF在阴茎体型及会阴型尿道下裂患者包皮组织中的表达
1材料与方法,2结果,3讨论
匡仁锐,朱遵伟 ,邓 君 ,李 贺,崔苏萍(1、南昌大学第一附属医院泌尿外科;2、江西省人民医院泌尿外科,江西 南昌 30006)
尿道下裂是一种因前尿道发育不全而致尿道开口达不到正常位置的阴茎畸形,是男童泌尿生殖系统最常见的先天性畸形之一,目前其发病机制尚不明确。CTGF是近年来备受重视的促纤维化蛋白因子,可通过基质金属蛋白酶参与基质的重塑,在机体的各类创伤修复过程中发挥重要作用,病理状态下CTGF可以促进细胞外基质的分泌和成纤维细胞增生,参与器官纤维化进程[1]。本研究希望明确CTGF与阴茎体型及会阴型尿道下裂的关系,从而推测CTGF可能在尿道下裂的发生发展过程中发挥重要的调控作用。
1 材料与方法
1.1 临床资料 选择2008年4月至2010年12月在南昌大学第一附属医院住院和门诊治疗的尿道下裂及包皮手术患者32例。尿道下裂组16例,平均年龄6.3(3~17)岁。根据阴茎伸直后尿道外口位置分为轻型(阴茎头型、冠状沟型、阴茎远侧型)、中型(后2/3阴茎体型)、重型(阴茎阴囊型、阴囊型、会阴型)。其中中型11例,重型5例,均为散发性患者,均无泌尿生殖系统的其它异常。对照组16例,均为接受包皮环切术的患者,平均年龄16(3~18)岁,无其它合并症存在。
1.2 实验方法
1.2 .1标本处理 组织样品为术中留取的中度(阴茎体型)和重度(会阴型)尿道下裂患者包皮组织和同龄正常患者包皮环切术的包皮组织(每组各16例),分别做好标记后装入冻存管,立即置于液氮罐中保存。1.2.2总RNA抽提 收集组织标本,按Trizol试剂说明书提取总RNA。所提总RNA行紫外分光光度计检测A260/A280在1.8~2.0之间,并计算浓度,-80℃保存备用。
1.2 .3 半定量 RT–PCR Trizol法提取总 RNA,以RT–PCR法对包皮组织CTGF的mRNA表达进行检测。一步法RT-PCR试剂盒购自美国Fermantas公司,CTGF以及GAPDH引物由上海生工生物工程公 司 合 成 ......
您现在查看是摘要页,全文长 7924 字符。