喻 琼，邓志辉

    (深圳市血液中心，广东 深圳 518035)

    1997年，Lo等[1]首先发现孕妇血浆中存在游离(cell-free)的胎儿DNA。直接利用孕妇外周血中的胎儿DNA，对胎儿的遗传信息进行无创伤性产前基因诊断，因无须穿刺或中止妊娠、对胎儿无任何创伤、可在妊娠早期进行、适合于继续妊娠对象等众多的优点，倍受临床围产医学研究者的关注和重视。

    孕妇血浆中胎儿游离DNA源于胎儿细胞和/或胎盘的凋亡[2，3]，相对含量丰富，在妊娠早期平均为 0.022～0.46ng/ml， 妊娠晚期为 0.46～5.08ng/ml，孕中期和孕晚期的孕妇血浆DNA浓度高于孕早期[4]；并且分娩后，孕妇血浆中胎儿游离DNA很快被清除，不会影响到下次孕娠。因此，胎儿游离DNA成为当前无创伤性产前遗传分析的重要来源。近年来，国内、外已有较多的应用研究文献报道。

    1 性别遗传鉴定

    目的是为了避免X-连锁隐性遗传性疾病，以利于优生优育。目前X连锁隐性遗传病有200多种，如杜兴肌营养不良，女性携带者和正常男性婚配，女婴为携带者的风险为50%；而男婴则有50%的患病风险。在性别遗传鉴定方面的研究，开展较早，国内外报道较多。如采用PCR技术、巢式PCR技术、荧光定量PCR方法检测Y染色体上的SRY基因、锌指蛋白基因(Zinc finger protein,Y-encoded,ZFY)，以及采用PCR复合扩增和荧光法基因扫描检测Y-STR等位基因，总符合率与孕周、血浆DNA提取方法及采用的检测技术等相关，业已报道的总符合率介于90%～100%[5-8]。

    2 RhD阴性孕妇的Rh(D)基因检测

    除胎儿性别鉴定外，首先引起研究者重视的是：Rh阴性孕妇的Rh(D)基因检测[9]。Lo等采用荧光定量PCR技术，检测12名早孕期、30名中孕期和15名晚孕期RhD阴性孕妇的血浆DNA，除2名早孕期的样本因模板DNA量少、出现假阴性外，其余的55例样本的Rh(D)检测结果完全正确[4]。此后的研究者以Rh(D)基因的不同区域作为靶基因，相继开展了研究工作，取得了较为可靠的结果[10-13]，特别是中孕期以后孕妇样本。

    3 常染色体STR及X染色体STR基因座检测

    直接利用孕妇血浆总DNA，采用荧光法复合扩增检测胎儿的常染色体STR等位基因，可获得男婴或女婴的STR遗传多态性信息。荧光法的检测所需模板DNA量少、检测灵敏度高、人为因素造成的误差小。Pertl等[14]自行合成、标记荧光引物 ......