冯丹琴，黄 波，刘 静，李 静，章海斌，肖 芸，熊火梅，陈希敏，王小中

    (1、南昌大学第二附属医院检验科，江西 南昌 330006；2、南昌大学第一附属医院检验科，江西 南昌 330006)

    ABL酪氨酸激酶抑制剂如伊马替尼、达沙替尼、尼罗替尼是BCR-ABL1激酶诱导的慢性粒细胞白血病(chronic myeloid leukemia,CML)慢性期的一线治疗药物。酪氨酸激酶抑制剂可以大量减少白血病细胞，但却无法清除白血病干细胞。所以，一些患者用酪氨酸激酶抑制剂治疗后产生耐药性[1]。对于酪氨酸激酶抑制剂耐药的CML患者来说，异体基因造血干细胞移植是首选的治疗方法。在造血干细胞移植之前用酪氨酸酶抑制剂对病人进行治疗，能为移植创造良好状态[2-3]。然而，造血干细胞移植诱发移植物抗宿主病已见报道[4-5]，为了减少移植排斥反应，可以用患者自身的BMSCs支持造血干细胞的造血作用。本实验进行了CML患者BMSCs的分离培养及成脂分化，为后续研究提供实验基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料 肝素化骨髓来源于南昌大学第二附属医院和第一附属医院血液科CML患者，Ficoll分离液(1.077g/ml)(Solarbio)，低糖 DMEM(L-DMEM)培养基(Hyclone)，胎牛血清 FBS(Hyclone)，青链霉素混合液(Solarbio)，胰蛋白酶-EDTA消化液0.25%(Solarbio)，地塞米松(Sigma)，1-甲基-3-异丁基-黄嘌呤 IBMX(Sigma)，吲哚美辛(Sigma)，牛胰岛素(上海第一生化药业)，油红O染料(Sigma)，4%多聚甲醛(碧云天生物公司)，分析纯异丙醇都是商品化试剂。

    1.2 方法

    1.2.1 BMSCs的分离、培养 在10ml玻璃离心管中加入2ml Ficoll分离液，再将2ml肝素化骨髓缓慢加至Ficoll分离液表面。2000r/min离心20min，用微量移液器小心吸出分界面的白膜层，PBS清洗1遍，用L-DMEM培养基(含有10%胎牛血清，100IU/ml青霉素，100μg/ml链霉素)重悬，以 1×106密度接种于塑料培养瓶中 ......