陈爱蓉，黄 毅

    (北京大学深圳医院，广东 深圳 518036)

    开米拉(Chimeras)是指一个个体中同时存在两个或以上不同来源的细胞的现象[1]。开米拉可以分为先天性的(如双生子之间通过血管交叉吻合而产生的)和获得性的(如异体造血细胞输注或移植)。目前，已经发现的开米拉现象主要有两种：一种是血型开米拉，也称做Twin Chimeras，是由于双生子之间的血管存在交叉吻合，造血细胞通过吻合的血管交换而产生的。另一种开米拉为全身性的开米拉，又称为 Tetragmetic Chimeras[2，3]，是指同一个体的不同组织中存在着不同来源的细胞的现象。这两种开米拉现象可以单独或同时存在。

    人类血型开米拉十分罕见，常常是在ABO血型鉴定中检测到同时存在两种红细胞而被发现的。开米拉现象常常会导致ABO血型遗传学的不相符。本文以一例12岁的男孩和他的父母、祖父3代4人的家系为研究对象，对罕见的血型开米拉进行分子遗传学的研究。

    1 材料与方法

    1.1 标本来源 检测对象是一个12岁的男孩，因发现右下腹包块伴腹痛2d入我院，嵌顿疝术前常规血型鉴定中发现血型鉴定困难。我们分别采集了该男孩和他父母、祖父共计4人的血液标本7ml：5ml不抗凝血，用于ABO血型分型；2ml EDTA抗凝血，用于DNA检测。该家系籍贯为湖南韶山，均没有输血史及血液病史，患者为独生子女。

    1.2 实验方法

    1.2.1 ABO血型血清学鉴定 血型正反定型、吸收放散试验、唾液型物质测定均按常规标准的试管法，其中2套单克隆抗A、抗B血清(长春博德，长春生物制品有限公司；Dominion Inc，加拿大)，抗AB(Bioscot，英国)、抗 A1 植物凝集素(Immucor公司)、抗H血清(Dominion公司)，反定型红细胞(上海血液技术公司)。

    1.2.2 ABO基因PCR-SSP(聚合酶链式反应-序列特异性引物)分型 快速盐析法从样本外周血中抽提基因组DNA，DNA样品于-20°C冷冻保存。使用G&T公司ABO基因分型试剂盒进行等位基因分型[4，5]，该试剂盒含有4对序列特异性引物，通过PCR-SSP分别检测ABO基因核苷酸序列的A1，A201，O1和B4个等位基因。内对照为扩增人类生长激素(HGH)基因的扩增产物为207bp。采用热启动技术即 95℃预温 5min，然后 95℃ 30s，60℃ 30s，72℃ 90s进行30个循环，72℃延伸 5min进行扩增。PCR产物检测：4.0%琼脂糖，10v/cm电泳25min ......