张佳娜，汪庆余，曾磊，陈青，陈婧，李庆，雷浪，王莉，郝华，苏晓燕，冯琼，刘繁荣，李里香，张文昌，徐高四，邬黎青

    (1、南昌大学第二附属医院病理科，江西南昌330006;2、南昌大学第二附属医院分子医学中心，江西南昌330006；3、南昌大学护理学院，江西南昌330006;4、南昌大学第二附属医院肾内科，江西南昌330006)

    ·论著·

    乳腺癌细胞中p73ɑ与ERɑ的相互关系

    张佳娜1，2，汪庆余1，曾磊1，陈青1，2，陈婧3，李庆1，雷浪1，王莉1，2，郝华1，苏晓燕1，冯琼1，刘繁荣1，李里香1，张文昌1，徐高四4，邬黎青1，2

    (1、南昌大学第二附属医院病理科，江西南昌330006;2、南昌大学第二附属医院分子医学中心，江西南昌330006；3、南昌大学护理学院，江西南昌330006;4、南昌大学第二附属医院肾内科，江西南昌330006)

    目的探讨乳腺癌细胞中ERɑ蛋白与p73ɑ蛋白之间物理上及功能上的相互关系。方法采用蛋白印迹法检测ERɑ与p73ɑ的蛋白表达；用免疫共沉淀法检测ERɑ蛋白与p73ɑ蛋白之间的相互结合；用荧光素酶分析实验进一步检测ERɑ与p73ɑ基因的转录活性，以探讨ERɑ与p73ɑ蛋白表达改变的原因。结果(1)经蛋白酶抑制剂MG132处理细胞后，ERɑ蛋白及p73ɑ蛋白能结合成复合体。(2)共转染ERɑ与p73ɑ时，ERɑ及p73ɑ能相互抑制彼此蛋白表达。结论乳腺癌细胞中ERɑ及p73ɑ能结合形成复合体并能相互抑制彼此蛋白的表达。

    乳腺癌；ERɑ；p73ɑ；相互结合

    流行病学资料显示，乳腺癌在中国是最常见的恶性肿瘤之一，占所有肿瘤的7%～9%，而且其发病率在逐年增加[1]。大量文献提示雌激素刺激乳腺上皮细胞在乳腺癌的发生及发展中起主要作用。雌激素通过多种不同的机制引起细胞改变。其中主要机制是结合核蛋白雌激素受体(ER)[2]。本研究中，我们检测ERα是否会与p73α物理性地结合以及在蛋白水平表达上这两个基因是相互促进还是相互抑制。通过免疫共沉淀法发现ERα与p73α能结合形成复合体。并发现共转染ERα及p73α能检测出的ERα及p73α的蛋白量均明显减少。结果报道如下。

    1 材料和方法

    1.1 材料MCF-7细胞株购买于中科院上海生命科学研究院细胞资源中心；P73α质粒及PCDNA3.0载体由Maki博士(美国芝加哥大学)惠赠；ERα质粒由Nardulli博士(美国伊利若依斯大学)惠赠；常规分子生物学试剂购于天根生化(北京)科技有限公司；多克隆的ERα抗体购自美国Santa Cruz Biotechnology公司 ......