应用Pre-S1 Ag诊断HBV感染的可行性研究
拷贝数,乙肝,抗原,1材料与方法,2结果,3讨论
杨玉洁,张绪署,苏丽君,邹海蛟,邹林峰,林雪迟(长沙医学院医学检验系临床微生物学与免疫学教研室,湖南长沙410219)
应用Pre-S1 Ag诊断HBV感染的可行性研究
杨玉洁,张绪署,苏丽君,邹海蛟,邹林峰,林雪迟
(长沙医学院医学检验系临床微生物学与免疫学教研室,湖南长沙410219)
目的通过HBV Pre-S1抗原检测,结合乙肝HBsAg、HBeAg与HBV-DNA检测进行比较分析,研究Pre-S1抗原作为诊断乙肝患者的血清标志物的可能性。方法用ELISA检测的HBsAg、HBeAg和HBV Pre-S1抗原,采用荧光定量PCR方法检测HBV核酸。结果相对于其他模式,“大三阳”的HBV Pre-S1抗原的检出率较高(89.32%),乙肝病毒DNA的copies也较高;在90例在HBsAg(-)、HBeAg(-)患者中,检出3例HBV Pre-S1抗原(3.33%);恢复期的3091例患者中也检查出4例Pre-S1 Ag(+)。结论HBV Pre-S1抗原可作为一种HBV感染血清标志物,HBsAg(-)并不能作为无HBV感染的指标,Pre-S1检测对于乙肝患者的诊断具有重大的价值。
HBV;Pre-S1抗原;HBV-DNA;荧光定量PCR;ELISA
传统上对乙肝患者诊断采用“两对半”检测,是发现乙肝患者和感染状况及抗体携带情况的主要指标,包括乙肝表面抗原(HBsAg)、表面抗体(抗-HBs),e抗原(HBeAg),e抗体(抗-HBe)和核心抗体(抗-HBc)。不同的组合模式代表不同临床表现,可以确定现症感染与既往感染及是否具有免疫力等。
荧光定量PCR(FQ-PCR)也称荧光实时PCR (Real-Time PCR),FQ-PCR法检测HBV-DNA,是直接检测的HBV病毒自身,能更准确的反映乙肝病毒在体内复制和宿主的传染性情况,是乙肝血清标志物检测必要补充,用于HBV定性与定量分析,反应的是病毒的载荷。荧光PCR反应同样存在很多影响因素,包括引物、反应体系、血清抑制物、标本稳定性等,对病毒的滴度也有一定的要求存在明显的局限性[1]。
HBV前表面抗原有S区基因编码,主要分Pre-S1与Pre-S2两类。Pre-S1抗原出现在急性乙型肝炎感染的最早期和乙肝的活动期,Pre-S1抗原主要用于HBV对肝细胞选择性、亲和性结合,是病毒传播、复制与增殖的前提条件,Pre-S1抗原表达水平与病毒侵袭力正相关。Pre-S2抗原 ......
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