T-SPOT.TB技术检测胸腔积液在结核性胸膜炎诊断中的应用
1材料与方法,2结果,3讨论
刘珍琼,段永和,张齐龙,叶琳,边泽源(江西省胸科医院检验科,江西,南昌330006)
结核性胸膜炎是一种常见的肺外病变,表现为淋巴细胞为主的渗出性炎症,由于该病在临床上缺乏特异性表现,早期诊断困难,用细菌学方法检测阳性率低,胸膜活检因其为创伤性操作限制了在临床上的广泛应用,分子生物学虽提供了快速诊断技术,但仍存在假阳性和技术方面的问题。结核杆菌感染T细胞斑点(T-SPOT.TB)技术是目前诊断结核性胸膜炎敏感性较高的细胞学检测技术[1]。我们应用T-SPOT.TB技术检测外周血单个核细胞(PBMCs)和胸腔积液单个核细胞(PEMCs)中被结核分枝杆菌早期分泌靶向抗原6(ESAT-6)和培养滤液蛋白10(CFP-10)致敏的T细胞数目,来探讨胸腔积液细胞学检查方法对结核性胸膜炎的诊断及与其它种类胸腔积液的鉴别诊断价值。
1 材料与方法
1.1 标本来源
1.1.1 结核性胸膜炎组 (TBP组)收集2011年12月至2013年2月本院结核内科、胸外科住院病人32例,其中男性18例,女性14例,年龄18~70岁,入选标准符合《结核病诊治指南》对结核性胸膜炎的诊断标准。
1.1.2 非结核性胸膜炎组 收集2011年12月至2013年2月本院肿瘤科、呼吸内科、胸外科非结核性胸腔积液病人26例,其中男性17例,女性9例,年龄19~73岁。
1.2 仪器与试剂 青岛海尔生物安全柜 (HR40-ⅡA2),CO2培养箱;T-SPOT.TB试剂盒 (英国Oxford Immunotec Ltd)和BD单个核细胞分离器(BD Vacutainer CPT tube)由复星诊断公司提供。
1.3 检测方法
1.3.1 外周血单个核细胞(PBMCs)的分离、收集 对每位入选患者采集肝素锂抗凝的外周血5~10ml,加入等体积RPMI 1640细胞培养液混匀后,加在预先准备好的Ficoll淋巴细胞分离液上层 ......
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