林媛媛 ，娄远蕾 ，梁昌达 ，谢淑佩 ，谢安

    (1、江西省儿童医院血液科，江西 南昌330006；2、南昌大学泌尿外科研究所，江西 南昌330006)

    上皮-间质转化(Epithelial-mesenchymal transition，EMT)是一种基本的生理病理现象，是指上皮细胞在特定的生理和病理情况下向间质细胞发生转化的现象，是一种哺乳动物胚胎发育与器官形成中的必需的生理过程[1]。由于EMT是上皮细胞获得迁移能力的有效方法，越来越多的研究发现，大量上皮细胞恶性肿瘤的浸润肌转移与此有关，因此研究EMT的发生和调控机制，对于寻找治疗恶性肿瘤特别是肿瘤转移的目标靶点的研究具有重要意义。

    诱导多能干细胞 (induced pluripotent stem cells，iPS细胞)是通过向体细胞中导入诱导基因，使体细胞重编程获得具有胚胎干细胞 (ES细胞)样特性的多能干细胞[2]。IPS细胞在细胞形态，生长特性，标志物，畸胎瘤形成等各类生物学特性均与胚胎干细胞类似[3]，同ES细胞一样，iPS细胞可作为胚胎发育的一个模型，同时干细胞与肿瘤相似的增殖及分化特性，对人iPS细胞的EMT的研究，对于研究EMT在组织胚胎发育以及肿瘤发生转移中调控机制，具有十分重要的作用。

    1 材料与方法

    1.1 细胞株 人iPS细胞系UMC-iPS由中国科学院广州生物医药与健康研究院惠赠[4]。

    1.2 主要试剂和仪器 DMEM/F12培养基、Knockout血清替代物、DMEM高糖培养基、非必需氨基酸、L-谷氨酰胺、巯基乙醇、碱性成纤维生长因子b-FGF(Gibco公司)；胎牛血清(北京全式金生物技术有限公司)；Trizol(Invitrogen公司)；反转录试剂盒(TAKARA公司)；兔抗OCT-4(Abcam公司)；Tritc标记牛抗兔IgG(Santa Cruz Biotechnology公司)；兔抗 E-cadherin、兔抗N-cadherin、兔抗Slug及兔抗Snail(Cell Signaling Technology公司)；辣根酶标记山羊抗兔IgG(北京中杉金桥公司)；牛血清白蛋白 BSA(Roche公司)；Ⅳ型胶原酶、DAPI、丝裂霉素C、RA和明胶(Sigma公司)；碱性磷酸酶(alkaline phosphatase，AKP)试剂盒购自上海太阳生物技术有限公司。倒置相差荧光显微镜X71(Olympus公司)，PCR 仪(Biometra 公司) ......