饶燕飞 ，邹湉 ，杨桂玲 ，王小中 ，丁伟荣

    (1、南昌大学第二附属医院检验科，江西 南昌 330006；2、南昌大学第二附属医院血液科，江西省血液病研究所，江西 南昌 330006；3、江西省人民医院，江西 南昌 330006)

    慢性粒细胞白血病 (chronic myelocytic leukemia，CML)是一种克隆性骨髓增殖异常性疾病，其特征是存在特异性Ph1染色体，形成bcr-abl融合基因，编码异常的融合蛋白P210，P210具有酪氨酸激酶活性，导致CML发生。迄今治愈CML的最有效方法是异基因造血干细胞移植(allogenenic stem cell transplantation，Allo-SCT)，然而由于受干细胞来源及患者年龄等诸多因素限制，仅有少部分患者能进行该方法治疗。目前，人们越来越重视免疫治疗，特别是T细胞介导的特异性免疫效应在CML治疗中的作用。异基因T细胞对Allo-SCT后CML复发能产生强力的保护作用；给Allo-SCT后CML复发患者输注同一供者的淋巴细胞，可诱导疾病的再次缓解，这是细胞免疫介导的移植物抗白血病(graft versus leukemia，GVL)作用的最直接证据，诱导和提高特异性T细胞免疫反应是根治CML的方向之一。

    近年来研究发现，CML细胞体外诱导可生成树突状细胞(DC)，称之为慢性粒细胞白血病-树突状细胞(CML-DC)。由于这种DC来源于白血病细胞，自身带有白血病抗原，而且又是抗原提呈细胞(APC)，因来自患者本身，不存在组织相容性复合物(MHC)限制，若其免疫功能得到肯定，它就有可能在白血病免疫治疗方面开辟崭新的领域。但有研究表明，未成熟白血病源性DC胞饮能力低以及成熟白血病源性DC功能有一定缺陷，其表面的CD80、CD83、CD86、MHCⅠ类和 MHCⅡ类分子表达减少[1]。本研究体外诱导培养CML-DC，观察其形态、免疫表型、白血病源性及其所诱导的细胞毒T淋巴细胞(CTL)反应。同时研究观察人CML总RNA体外转染对CML-DC抗原递呈功能的影响，以探讨RNA抗原负载DC疫苗体外制备的有效性。

    1 材料与方法

    1.1 标本来源 标本来源于我院2006年2月至2007年8月初治未经化疗CML患者14例 (慢性期)，男9例，女 5例。年龄22～70岁。Ph1染色体和bcr-abl融合基因均阳性。诊断及分期标准见参考文献[2]。

    1.2 主要试剂 RPMI 1640培养基为GIBCOBRL公司产品；四甲基偶氮唑盐(MTT)为Sigma公司产品；DMSO购自上海华美生物工程公司；重组人粒单核细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)、重组人白细胞介素 4(rhIL-4)、肿瘤坏死因子 α(TNF-α)均购于Peprotech公司；CD83、CD1α单抗购于Caltag公司 ......