孔令和，柯云霞，高素香，杨剑，雷桂萍，史国香，黄洁

    (九江市第三医院，江西 九江332000)

    结核病是一种严重危害人民健康的慢性传染病，据WHO统计，全球有约20亿人感染结核分枝杆菌，每年约为200万死于结核病[1]。我国是世界上仅次于印度的第2个结核病大国，结核感染率为44.5%，活动性结核患者450万，每年死亡人数达13万[2]。目前在结核病方面，临床实验室常用检测的方法是有：涂片抗酸染色法、培养法、实时荧光PCR(TB-DNA)检测、结核抗体和结核菌素试验等。由于涂片抗酸染色阳性率低，结核分枝杆菌培养的检测时间较长等原因，都无法很好地服务于临床。所以寻求准确、快速、可靠的诊断结核病方法非常重要。

    近年来研究表明IFN-γ是抗结核感染免疫中的关键细胞因子[3]，主要由激活的T淋巴细胞在结核特异性抗原刺激下产生。T-SPOT.TB诊断实验以BCG以及大多数环境分枝杆菌中均缺失，仅存在于堪萨斯分枝杆菌及海分枝杆菌等少数环境分枝杆菌中的RD1基因合成的抗原靶-6(ESAT-6)及蛋白-10(CFP-10)作为刺激抗原[4],结核分枝杆菌感染外周血单个核淋巴细胞(PBMC)中存在结核特异性T细胞，T淋巴细胞受到结核杆菌特异性抗原刺激后分泌IFN-γ。我们应用此方法对临床患者相关标本进行了检测，现报告如下。

    1 资料与方法

    1.1 标本来源 收集我院自2012年11月至2013年5月在肺、呼吸两科住院疑诊或待排结核病的患者，共273例，资料较完整有169例，其中男性115例，女性54例，年龄在2~81岁，平均年龄为55.3岁。进行了T-SPOT.TB方法检测。

    1.2 试剂和仪器

    1.2.1 T-SPOT.TB试剂盒，淋巴细胞分离液、AIM、RPM1640培养液由上海长征复星公司提供。

    1.2.2 美国Thermo Formo生物安全柜、Galaxy Rs-Biotech CO2孵育箱、Neofuge 1600R型台式高速水平离心机、

    1.3 原理 T-SPOT.TB技术是利用结核分枝杆菌感染外周血单个核淋巴细胞(PBMC)中存在结核特异性T细胞 ......