李洁，傅勇辉，吴琼，孙万磊，袁铿

    (1、南昌大学第二附属医院 江西省分子医学重点实验室，江西 南昌 330006；2、江西省精神病医院，江西 南昌330029；3、江西省医学科学研究院，江西 南昌 330006)

    间充质干细胞 (mesenchymal stem cell,MSC)是近年来一种重要的种子细胞,它不仅具有支持造血、调节免疫的功能，而且在一定条件条件下能分化成为骨、软骨、脂肪、肌肉等组织被应用于组织工程及各种疾病的治疗，具有广阔的临床前景。身体的各种组织均具有MSC的存在，现在MSC主要来源于骨髓、脐血和脐带。骨髓源性MSC存在高度病毒污染的可能,且随着年龄增长其细胞数量和扩增、分化能力出现明显下降趋势。胎儿脐血MSC含量非常低,且其分离会损失脐血造血干细胞,影响脐血冻存。故寻找一种新的MSC来源,已成为细胞组织工程研究的热点。我们设计本实验利用被人们所废弃的脐带培养出MSC，并对培养出的MSC进行生物学特性的鉴定，同时将传代后的细胞冻存复苏观察冻存复苏对其生物学特性的影响，为脐带MSC的保存从而被更广泛的应用提供实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料 采集正常分娩胎儿脐带组织标本。方法：UC-MSC的分离培养：脐带以75%酒精浸泡10min后剪成5cm左右的小段，以PBS冲洗3遍后剥去血管及外膜，将去除血管及外膜的脐带剪成长条状并以1mg/ml胶原Ⅱ置于37℃、5%CO2、饱和湿度的培养箱中消化18～21h。取出脐带，消化液加PBS稀释降低黏度 ......