郭广秀，张功亮，肖军兰，黄金长，王建

    (赣州市人民医院 病理科，江西 赣州 341000)

    柯萨奇-腺病毒受体 (Coxsackie and adenovirious receptor，CAR)是柯萨奇 B病毒(CBV)和腺病毒(ADV)与靶细胞结合的共同受体。CAR因其作为腺病毒受体介导携带治疗基因的腺病毒载体进入宿主细胞发挥治疗作用而受到广泛关注[1]。CAR作为细胞间粘附分子，参与了多种肿瘤发生发展的病理过程[2]。本文应用免疫组化方法检测CAR在肺癌和癌旁组织中的表达情况，并分析其与临床病理因素之间的关系。

    1 材料与方法

    1.1 一般材料 收集2009年1月至2012年12月我院病理诊断明确的肺癌手术切除标本70例、支气管镜活检标本5例，其中鳞癌43例，腺癌27例，小细胞癌5例。同时采用癌旁(距离癌肿5cm以外)组织作为对照组。所有组织均经10%中性缓冲福尔马林固定10h，石蜡包埋组织。

    1.2 试剂 鼠抗人CAR单克隆抗体购买自美国Upstate公司，EnVision试剂盒及DAB显色试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。

    1.3 实验方法及步骤 免疫组化EnVision法：观察存档肺癌及癌旁组织玻片，挑选对应最佳蜡块，4um切片，60℃考片1h，二甲苯脱蜡后置酒精，水化后置入PBS液，3%H2O2阻断内源性过氧化物酶，用0.01M、pH6.0枸橼酸盐缓冲液抗原修复，100℃15min，自然冷却，CAR(1:100)一抗孵育，4℃过夜，0.01M、pH7.2～7.4PBS 冲洗 10min， 再用 En-Vision 二抗孵育，37℃ 60min，0.01M、pH7.2～7.4PBS冲洗10min，DAB显色(显微镜下观察，及时终止显色)，苏木素衬染，二甲苯透明，中性树胶封片。用PBS代替一抗作阴性对照。

    1.4 结果判定 所有切片均经由两位有经验的病理医师进行阅片、计数及判断。随机选择5个高倍镜视野(×400倍) ......