王长奇，杨志华，罗娜，陈燕萍，周开良

    (江西萍矿总医院检验科，江西 萍乡337000)

    人乳头瘤病毒 (human papillomavious，HPV)为小的双链DNA病毒，其中高危型HPV是生殖道恶性肿瘤的危险因素，与宫颈癌的发生有着密切关系[1]，尤以HPVl6型感染率最高，约50%的宫颈癌患者肿瘤组织的DNA为HPVl6型[2，3]，而 HPV早期基因E6 E7的表达在细胞癌变过程和维持细胞恶性表型方面起着重要作用。为了分析研究江西地区HPVl6感染的基本情况，我们从宫颈组织中分离、克隆了HPVl6 E7基因，进行序列测定，并与网上发表的毒株比较，发现江西地方株与标准株(德国)及其他地区分离株之间存在一些变异。该株的获得，将丰富我国HPVl6感染的流行病学资料，为HPV疫苗的开发应用奠定基础。

    1 材料与方法

    1.1 研究对象 采用住院病人，共14人；年龄在32~78岁之间；平均年龄55岁。所有病例来自赣州6例，鹰谭1例，南昌市内3例，九江2例，萍乡2例。病理学诊断：鳞癌6例，CINⅢ 6例，CINⅡ 2例，临床病理资料于病理科获得。同时采用5例宫颈脱落细胞学检查 形态无异常、HPV检测阴性标本为对照。

    1.2 试剂及仪器 Taq聚合酶、限制性内切酶、5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(X-gal)、异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)等购自上海生物工程公司，T4DNA连接系统、DNA Marker购自大连宝生物公司，凝胶回收试剂盒购自QIAgen公司。质粒和宿主菌pGEM-Teasy载体购自Promega公司，宿主菌DH5a由比较医学中心保存。DNA提取试剂盒，人乳头瘤病毒核酸扩增分型检测试剂盒及核酸分子杂交仪由潮州凯普生物化学有限公司提供 ......