徐晶，张莹莹，杜忻，陈火玲，杨南，张晓丽，尹金凤

    (1、南昌市血站，江西 南昌330025；2、南昌大学第四附属医院肾内科，江西 南昌330003)

    血小板(platelet)是由骨髓巨核细胞产生并释放于血液循环中的最小细胞,在止血和凝血过程中发挥着重要的作用[1]。由于血小板保质期较短，临床输注需求量大，加之临床输注需求时间的不确定性，造成了血小板过期浪费和临床供不应求的两难尴尬局面[2]。目前国内血小板主要保存方式是22℃振荡保存，有效期为5d。此外血小板还可深低温冰冻保存，但这种方法的保存效果和临床疗效不确切[3，4]。冷冻干燥技术已广泛应用于各种生物材料的保存，冻干制品具有常温下保存、性能稳定、便于运输的特点[5]。本研究以过期血小板为原料，探索血小板冻干再水化的条件，检测其冻干再水化后凝血功能的变化，为过期血小板再利用及新鲜血小板冰冻或低温保存研究提供了依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 血小板来源 实验组选择体检合格，一周内未服用阿司匹林等抗血小板药物的自愿献血者，用血细胞分离机单采富含血小板血浆，22℃振荡保存5d过期；对照组选择新鲜机采血小板。

    1.1.2 主要试剂和溶液 海藻糖 (CH22O11·2H2O，北京经科宏达生物技术有限公司)；牛血清白蛋白(BSA，上海生工生物工程有限公司)；磷酸盐缓冲液(PBS)；血小板聚集诱导剂二磷酸腺苷(ADP，Sigma公司)；凝血酶(Sigma 公司)；胶原(Sigma 公司)；瑞斯托霉素(Sigma 公司)；CD62P-PE(Bioscience 公司)；PAC-1-FITC(BDIS公司)；海藻糖加载缓冲液(含50mmol/L 海藻糖 ......