罗忠勤，陈小文

    (南昌大学第一附属医院检验科,江西南昌330006)

    ·实验研究·

    江西南昌郊区松树花粉过敏原的分离与鉴定

    罗忠勤，陈小文

    (南昌大学第一附属医院检验科,江西南昌330006)

    目的对江西南昌郊区松树花粉的变应原组分进行分离及免疫学鉴定。方法提取松树花粉粗提液，然后通过十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)对松树花粉的蛋白质组分进行分离并测定其分子量,采用免疫印迹(Western-blotting)法鉴定其变应原成分。结果松树花粉粗提液有10余条蛋白带,其中分子量为12kD、26kD和100kD的蛋白可与松树花粉过敏性病人血清IgE结合，其中26kD为主要变应原。结论对松树花粉变应原进行了初步的分离、鉴定，为进一步对松树花粉变态反应性疾病的临床诊断和治疗提供初步的实验基础。

    松树花粉;变应原;SDS-PAGE；Western-blotting

    变态反应性疾病是临床上的常见病、多发病。花粉作为一种重要的吸入性的过敏原,可引起“花粉症”(枯草热)等疾病的发生及相应病症,如眼结膜、鼻黏膜和支气管过敏症状,甚至哮喘发作[1,2]。马尾松在江西地区被广泛地用作经济造林，同时具有种植面积广泛，开花期长的特点，能产生大量花粉,且此类花粉带有气囊,可借风力飘散至极远地区。国内外不少气传致敏花粉调查均证实其为春季主要花粉之一[3-6]。松树花粉大小约为60～120μm，不易进入下呼吸道，并且蛋白含量低。因此长期以来被认为具有低致敏性。近来，有不少文献报道通过对花粉症患者进行皮内试验发现松科花粉亦是其主要过敏原之一[7,8]。但鲜见对其过敏原进行分离和鉴定的报道。因此我们对南昌市郊主要经济林之一—马尾松花粉粗提液进行分离,并同时对其花粉变应原免疫学特性进行鉴定，现报道如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料松树花粉采自南昌市郊；14例对松树花粉过敏患者血清标本由南昌大学第一附属医院提供。

    1.2 主要仪器和试剂垂直电泳槽、转膜电泳槽、凝胶成像及分析系统。丙烯酰胺(Acr);十二烷基硫酸钠(SDS)；生物素标记的IgE二抗、辣根过氧化物酶标记的亲和素(链霉亲和素)；其余均为国产分析纯试剂。

    1.3 松树花粉粗提液的提取取松树花粉适量于液氮中充分研磨 ......