乙肝病毒全S蛋白反式激活蛋白1在膀胱癌组织中的表达分析
基因芯片,明显降低,浸润性,1材料与方法,2结果,3讨论
林丽华 ,吴秀珍 ,黄绍娥 ,卓德祥 ,涂文瑞(1、福建医科大学附属三明第一医院检验科,福建三明365000;2、三明市中西医结合医院检验科,福建三明365000)
膀胱癌有非浸润性膀胱癌和浸润性膀胱癌两种类型。这两种类型的膀胱癌有着不同的分子改变,并且临床预后也不相同[1]。前者发病率较高,约占膀胱癌患者总数的70%,对生命威胁较小,但却因易复发需要定期复查,对患者造成巨大的经济负担;浸润性膀胱癌发病率较低,占临床上膀胱癌总数的30%,但其往往更容易发生远处转移而导致不良的临床后果[2]。为深入研究膀胱癌在分子水平的改变,我们用基因芯片分析两种类型膀胱癌的基因表达谱,结果显示乙肝病毒全S蛋白反式激活蛋白 1(complete S transactivated protein 1,CSTP1)[3]在膀胱癌组织表达较癌旁组织明显降低,信息学分析显示CSTP1 mRNA编码一个分子量36kDa的蛋白磷酸酶催化亚单位结构域(protein phosphatase 2A catalytic unit,PP2Ac)。 为进一步验证基因芯片结果,我们用RT-PCR及免疫组化方法检测CSTP1基因mRNA及蛋白在膀胱癌组织和癌旁组织中的表达差异,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 RT-PCR 提取膀胱癌及癌旁组织总RNA,反转录合成cDNA第1链,上下游引物:5'-ACA TCC ACT CAA ACG CTC ACC-3'和5'-ACA CAT GGG GAT TAT GGG GAT-3',扩增 CSTP1 基因(140bp)。
1.2 抗体制备 合成IDEDDDYYFNLSKSTRKKLA多肽抗原,将多肽抗原与完全弗氏佐剂充分混合乳化后进行首次皮下、皮内多点注射。将不完全弗氏佐剂与抗原混合,于第14、24、35d进行加强免疫。末次加强免疫后6d耳缘静脉取血进行抗体特异性测定。末次取血后5d心脏取血 ......
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