线性探针技术和传统基因检测技术在耐药结核病诊断中的可靠性和及时性对比
异烟肼,利福平,1资料与方法,2结果,3讨论
韩珍,林日文,骆妙卡(惠州市结核病防治研究所,广东 惠州516008)
结核病(Tuberculosis,TB)是可造成人类死亡的常见感染性疾病,是全球公共卫生面临的重大威胁[1]。近年来耐药结核病的发病率不断上升,耐药结核病是结核病控制的难题。TB的早期特异性诊断和及时治疗、及时切断传播链并保护易感人群对结核病的治疗和预防具有重要意义[2]。细菌学早期诊断是结核病防治的关键,抗酸染色、罗氏固体培养等传统TB诊断技术操作简单、经济、方便,易于推广,但也存在耗时长、敏感度和特异性差、难以标准化等不足,无法满足临床需求[3,4]。随着医疗技术的发展,分子线性探针杂交技术检测结核病的临床应用得以推广[5]。然而目前国内外关于分子线性探针技术和传统基因检测技术在耐药结核病诊断中的可靠性和及时性分析比较少。本研究比较MTBDR plus技术和传统基因检测技术诊断耐药TB的结果。准确性、敏感度、特异度、Kappa值及出报告所需时间,为耐药TB的早期诊断方法的选择提供依据,现将结果报道如下。
1 资料与方法
1.1 研究对象 连续纳入2014年1月至10月期间我院收治的246例涂阳肺结核患者作为研究对象。246例患者中男127例,女119例,年龄19~79岁,平均年龄(42.52±8.78)岁,患者均无其他呼吸系统疾病或严重心肺肝肾功能障碍。
1.2 检测方法
1.2.1 痰标本的收集 每例例涂阳肺结核患者均留取连续3d共3份痰标本,将获取标本置于4℃冰箱中保存并于留取标本3d内完成耐药情况的诊断。痰标本的分离和培养均严格按照中国防痨协会《结核病诊断实验室检验规程》的要求进行。
1.2.2 传统药敏实验 对分离出的菌株进行结核分枝杆菌菌种进行鉴定并进行异烟肼和利福平药敏实验,菌株鉴定采用对硝基苯甲酸和噻吩-2-羧酸肼鉴别培养基进行生长实验。药敏实验参照WHO/IUATLD标准,菌株培养采用中和离心法,使用接种环取一环培养基上的菌落制成1mg/ml的悬液并梯度稀释为10-2和10-4mg/ml,分别接种于含40μg/ml利福平和0.2μg/ml异烟肼的罗氏固体培养集中。将标本置于37℃恒温箱中培养,培养时间为6周。培养完成后读取菌落数并计算耐药百分比,耐药百分比低于1%为敏感 ......
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