曹美林，李佳，邓慧，殷网虎

    (镇江市中医院检验科，江苏 镇江212003)

    菌种保存方法众多，选取建立一种保存期长、占用空间小，简便易行的保存方法，使菌种的生命以及生物学特征得到有效延续是广大医学工作者探讨的重要课题[1，2]。我院微生物实验室采用滤纸低温冷冻法保存临床菌株，取得了较好的效果，现报告如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 标准菌种 金黄色葡萄球菌ATCC29213、大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853，菌株均购自杭州天和微生物试剂有限公司。

    1.1.2 临床菌株 观察对象为本室临床分离菌株，包括铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、屎肠球菌、白念珠菌等。

    1.1.3 菌株保存管 取新华定性滤纸，剪成大小约15mm×3.5mm，放入1.5ml带盖塑料离心管内，每管1~2片，将离心管编号，用离心管盒装载，121℃灭菌30min后备用[3]。

    1.1.4 培养基和仪器 营养琼脂、SS培养基、哥伦比亚血平板、麦康凯培养基等培养基由上海科玛嘉微生物技术有限公司生产；珠海迪尔细菌鉴定系统及配套的细菌鉴定条；三洋Biomedical Freezer低温冰箱。

    1.2 方法

    1.2.1 保存方法 将室内质控菌种在血琼脂培养基上分离纯化，用消毒钳子钳上滤纸片于平板上刮取，每片尽可能刮取较多的菌苔。放于带盖塑料离心管内，盖上盖子，每菌36管，写上菌名，置于低温冰箱的-20℃冷冻保存。对于临床日常分离出的阳性菌株，先分纯目的菌，完成鉴定药敏操作 ......