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编号:1452399
病理石蜡标本基因检测中D N A提取(离心柱型)的几点体会
http://www.100md.com 2015年4月3日 实验与检验医学 2015年第3期
切片,消化,1标本及时合适的固定是石蜡标本基因检测的关键步骤,2足够的肿瘤细胞是石蜡标本基因检测的必备要求,3DNA提取是石蜡标本基因检测的前提条件,4DNA定量
     陈顺平,苏海燕,吴文乔

    (福建医科大学附属漳州市医院病理科,福建 漳州363000)

    随着分子生物技术在临床中开展,其所覆盖的检测疾病的范围越来越广,不仅在常规医学检验中,近年来随着临床靶向治疗的普及,病理肿瘤标本的相关基因检测也得到发展。然而,什么样的病理标本适合做基因检测?怎么才能够得到更多更好的DNA呢?是目前我们病理科开展此项目所面对的问题。经过我们不断实践,现将几点体会介绍如下。

    1 标本及时合适的固定是石蜡标本基因检测的关键步骤

    活组织或脱落细胞应得到及时且合适固定液固定,一般活组织离体30 min内冻存或10%中性缓冲福尔马林固定,脱落细胞应及时离心,-80℃保存或用棉絮纸包裹,按组织常规处理。合适固定液及时固定可以大大降低DNA的降解,减少基因的片段化,同时避免使用含重金属固定液,如Bouin液等。若标本固定不佳,在后期的标本制备过程则无法加于纠正。临床送检组织标本时间与固定后标本取材时间之差最好统一,一般为6~48 h为好[1,2]。活检小标本一般为6~12h,组织大标本为6~48h且按要求剖开固定,保证标本充分固定,有效保护细胞中DNA质量,提高DNA提取效率,保证检测结果的可靠性。

    2 足够的肿瘤细胞是石蜡标本基因检测的必备要求

    足够的肿瘤细胞是基因检测DNA提取的基本条件,也是必备要求。在挑取肿瘤组织蜡块时,应充分地考虑肿瘤细胞数量、组织类型及避开坏死组织等。在提取标本DNA时一般应首先进行病理评估,了解肿瘤细胞的数量、肿瘤细胞百分比及组织类型 ......

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