尚丽红,游瑞君,武小桐,王振兴,张文艳

    (山西省第二人民医院肾移植中心，山西 太原030012)

    多瘤病毒属于乳多空病毒属，其中BK病毒(BKV)和JC病毒(JCV)可以使人类致病。在肾移植病人，免疫功能低下[1-3]，多瘤病毒的潜伏感染率较高。约有10%~60%的肾移植患者可再次激活多瘤病毒，但不影响肾功能；1%~10%的肾移植患者可发生多瘤病毒相关性肾病(Polyomavirus-associated nephropathy,PVAN)[4]。

    BKV是导致PVAN的主要原因[5]，与JCV具有75%的序列同源性[6]。据报道[6]，大约3%的JCV感染患者可导致PVAN的发生；但如果JCV与BKV同时发生感染的患者，PVAN发生的机率将上升到15%[7]。目前，尚无有效的抗病毒药物。普遍的处理方法是恰当地调整免疫抑制剂的类型和用量以减少病毒的复制，但又增加引发排斥反应的风险。因此，建立快速、有效的检测方法，对PVAN的早期预测和诊断对肾移植患者预后有着重要的临床意义。

    目前，常用的检测方法[8,9]有：(1)尿液诱耳细胞(decoy细胞)细胞学检测；(2)尿液、血液中PCR检测DNA；(3)免疫组化检查。近年来，人们推崇无创性检测方法，即采用PCR检测体液病毒DNA作为筛选。利用PCR方法检测这两种病毒具有更高的灵敏度和特异性，对监测肾移植术后患者多瘤病毒的感染、及早发现和治疗都具有指导作用。

    因此，本文利用荧光定量PCR(探针法)方法，检测肾移植术后患者体内的BKV和JCV含量，为患者的临床诊断和治疗方案提供重要依据。

    1 材料与方法

    1.1 研究对象 分别收集山西省第二人民医院肾移植中心2013年6月至2014年5月期间肾移植术后患者尿液标本153例、血液标本155例，其中男性92例，女性61例。所有患者自愿接受BKV、JCV病毒的检测。

    1.2 实验标本和试剂 在患者行肾移植术后，收集尿液和血液。具体收集方法如下：(1)血浆样本采集：用无菌注射器在受检者手臂弯曲处或手背处抽取静脉血3～5ml，注入含有EDTA的无菌收集管，立即轻轻颠倒混匀，室温放置不超过4h，待样本自行析出血浆或直接室温1600rpm离心5min分离出血浆，转移到1.5ml灭菌离心管中备用。(2)尿液样本采集：留取中段晨尿10～20ml(不超过容器体积的2/3)密封送检。(3)样本保存：样本应尽快检测，4℃保存不超过24h，-20℃条件下可以保存数月，-70℃条件下可以长期保存，但不可反复冻融 ......