梁华，余艺萍，蓝毓红，付向春，刘春菊，李玮婷，杨军平

    (江西中医药大学附属医院检验科，江西 南昌330006)

    目前全球每年约有27万例女性死于宫颈癌，宫颈癌已经成为女性第二常见的恶性肿瘤，其发病率仅次于乳腺癌[1]，人乳头瘤病毒(HPV)感染是宫颈癌发生的必要条件，研究证实99%的宫颈癌病例与生殖系统HPV感染有关[2]。HPV是一种微小的双链闭环DNA病毒，迄今为止已经发现200多种基因型，其中50多种与生殖道感染相关[3]。目前，HPV基因分型检测作为临床筛检宫颈癌的有效方法，已经受到越来越多的关注[4]。而对于不同种族不同地区不同感染人群来说HPV亚型分布也会存在差异，明确在某特定区域HPV的感染率及型别分布差异能为该地区宫颈癌防治和流行病学调查提供依据，同时对开发HPV疫苗也能发挥积极的指导意义。本研究回顾分析了2014年1月到2015年6月在本院妇科门诊就诊的患者宫颈细胞HPV基因分型检测结果，以了解该地区HPV感染率、21种基因型分布与年龄的关系。

    1 材料与方法

    2014年1月至2015年6月本院妇科门诊就诊的2659例女性，年龄16～84岁，平均年龄40.5±10.3岁。

    1.1 仪器与试剂 PE9600型PCR扩增仪为美国PE公司产品，HybriMax医用核酸分子快速杂交仪为广东凯普公司自主研发。HPV-DNA基因组提取试剂盒、PCR扩增试剂盒和核酸分子快速杂交试剂盒(21种基因型)均为广东凯普公司产品。

    1.2 方法

    1.2.1 标本采集与保存 标本采集在非月经期，1天内禁性生活，3d内禁阴道用药或冲洗。先以扩阴器暴露宫颈，用棉拭子将宫颈口过多的分泌物擦去。采用专用的宫颈脱落细胞采集器中的宫颈刷伸入宫颈口处，顺时针旋转3~5周以获取足量的上皮细胞样本，再将宫颈刷头部放入装有细胞保存液的样本管中，在管口处将多余的刷柄折断，旋紧样本管盖，做好标记，立即送检，或置于-20℃冰箱保存待检。

    1.2.2 DNA提取 将带有刷头的样本管在漩涡振荡器上充分振荡混匀后 ......