血液病毒核酸检测单独阳性标本研究
乙肝,试剂,1材料与方法,2结果,3讨论
田耘博,黄霞,秦伟斐,李维,毛伟,廖红文,段恒英,何涛(重庆市血液中心,重庆 400015)
献血样本的病毒核酸检测 (nucleic acid testing,NAT)可有效地降低输血相关传染病病毒的传播风险,在采供血机构正广泛普及[1]。运用NAT不仅能检测出很多在酶联免疫吸附检测 (enzymelinked immuno sorbent assay,ELISA)窗口期(window period,WP) 的乙型肝炎病毒 (HBV)、 艾滋病毒(HIV)和丙型肝炎病毒(HCV)感染,还能避免因病毒变异,免疫静默性感染等导致的常规ELISA的漏检[2]。对于体现NAT优势的NAT单独阳性献血样本,其真正的阳性率和不同NAT检测系统结果的差异,我们进行了一些研究和探讨。
1 材料与方法
1.1 标本来源 重庆市血液中心2011年3月-12月经体检和血液快检合格的无偿献血者血液标本47004例。分别用含分离胶的 “非可替”抗凝真空NAT专用采血管(含EDTA-K2喷雾干粉)采集6~8 ml全血用于NAT检测;“BD”抗凝真空采血管(含EDTA-K2喷雾干粉)采集4~5ml全血用于ELISA检测。采集后的标本管置于4℃保存,在采集4~6h内1800g离心10min,检测前置于4℃保存。
1.2 主要仪器 RSP150/200型全自动加样仪 (瑞士TECA公司)和FAME 2420/30全自动酶免分析仪(瑞士HAMILTON公司)、Procleix TIGRIS全自动核酸检测分析系统 (美国诺华公司)及配套的PRI(试剂准备温育器,美国Chiron公司)、MAGCOR核酸全自动提取仪(台湾MAGCORE公司)、ABI7500荧光定量PCR仪(美国ABI公司)、RT3100洗板机(深圳雷杜公司)、EXL808酶标仪 (美国BIO-TEK公司)、L535R离心机(湖南湘仪公司)。
1.3 主要试剂 ⑴ELISA检测试剂:HBsAg为乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒 (北京万泰,批号:350277、350279;法国生物梅里埃,批号: BM4732、BM3328)、丙型肝炎病毒抗体诊断试剂盒(上海科华,批号:201105432、201105443;美国强生,批号:GH5809、GH5897)、HIV(1+2)P24 抗原及抗体诊断试剂盒 (法国生物梅里埃,批号:BV32876、HG33287)、HIV抗体诊断试剂盒(上海科华,批号:201101234、201103213)。⑵核酸检测试剂:Procleix Ultro核酸检测试剂盒 (美国诺华公司 ......
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