冯 清，史鸿志，林 燕，雷承泳

    (1、赣州市人民医院生殖医学科，江西赣州341000；2、秦皇岛市妇幼保健院生殖医学科，河北秦皇岛066000)

    小鼠促排卵-体外受精动物模型的建立

    冯 清1，史鸿志2，林 燕1，雷承泳1

    (1、赣州市人民医院生殖医学科，江西赣州341000；2、秦皇岛市妇幼保健院生殖医学科，河北秦皇岛066000)

    目的建立小鼠促排卵-体外受精动物模型。方法腹腔注射不同剂量促排卵药物促使昆明小鼠排卵，分析各组剂量下获取的卵-冠-丘复合物和MⅡ卵子数以确定较佳剂量组合。再用微滴法受精+微滴法培养、四孔板法授精+四孔板法培养、四孔板法授精+微滴法培养3种方法实施小鼠体外受精技术。比较各组的受精率、卵裂率、囊胚率确定较佳受精、培养方法。结果⑴6～8周龄昆明小鼠采用尿促性腺激素(HMG)8U+绒促性腺激素(HCG)8U剂量组合获得卵子数目最多，成熟度最好(P<0.05)；⑵四孔板法授精+四孔板法培养受精率最高，但卵裂率、囊胚率与其它两组无显著性差异。四孔板法授精+微滴法培养既能方便受精操作也有利于胚胎单个追踪观察。结论6～8周龄昆明小鼠采用HMG8U+HCG8U剂量组合能最有效获取卵子；四孔板法授精+微滴法培养是体外受精技术的较佳方法。

    促排卵技术；体外受精技术；小鼠卵；模型

    小鼠促排卵-体外受精动物模型的建立是临床开展体外辅助生殖相关技术的首要内容。它的建立有利于生殖实验室人员在现有实验环境下熟悉体外受精-胚胎移植操作过程，检测胚胎培养环境，优化体外受精流程，为临床体外辅助生殖相关技术的尽快开展提供实践依据和工作基础。

    本实验旨在探索昆明小鼠促排卵药物HMG和HCG的较佳剂量组合和建立小鼠体外受精技术的稳定方法。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物6～8周SPF级昆明小鼠(动物许可证号：SCXK(赣)2011-0001，江西中医学院实验动物中心)母鼠65只，体重27.58～34.21g，5只一笼饲养；公鼠20只，体重32.25～35.87g，单独饲养。在安静、清洁环境中饲养，自由摄食饮水，12h光照周期。1.2主要仪器体视显微镜(Nikon SMZ800)，倒置显微镜(Nikon Ti-S1000)，CO2培养箱(Labotect C200)，钟表镊，眼科剪等。

    1.3 实验试剂HMG(丽珠集团丽珠制药厂)，HCG (丽珠集团丽珠制药厂)，G系列序贯培养液(瑞典瑞利芙公司)，透明质酸酶(瑞典瑞利芙公司)。

    1.4 促排卵药物剂量分组同一批次母鼠随机分成A(HMG6U+HCG6U) ......