结核分枝杆菌实验室诊断方法及评价
结核病,1细菌学检查,2免疫学诊断技术,3分子生物技术
胡彦综述,陈娟娟,王小中审校(、南昌大学0级卓越医师班,江西南昌330006;、南昌大学第二附属医院检验科,江西南昌330006)结核分枝杆菌实验室诊断方法及评价
胡彦1综述,陈娟娟2,王小中2审校
(1、南昌大学2012级卓越医师班,江西南昌330006;2、南昌大学第二附属医院检验科,江西南昌330006)
摘要:目前,我国的结核病(tuberculosis,TB)疫情已相当严重,结核病的防治形势亦十分严峻。因而,如何快速诊断、尽早治疗结核病,在控制疫情方面显得尤为重要。近20年,结核病的实验室诊断技术得到了较大的发展,主要有以下三个方面:细菌学检查方法、免疫学诊断技术和分子生物学诊断技术。
关键词:结核病;分枝杆菌;实验室诊断
结核病是一种由结核分枝杆菌(Mycobacterium Tuberculosis,MTB)感染,严重危害人类健康的慢性传染病。依据世界卫生组织(WHO)2013年全球结核报告[1],2012年新发结核病患者约860万例,其中约130万例患者死亡。近年来,我国结核病发病率逐年上升,大约30%的人口感染MTB,其中约10%发展为活动性结核病[2]。目前临床上检测MTB的方法众多,不同方法的临床性能不一[3-5]。由于诊断方法的落后和迟缓使结核病的控制变得复杂而困难。在结核病防治的严峻形势下,早期诊断便成为控制结核病传染的关键因素。
1 细菌学检查
1.1痰涂片染色镜检法
1.1.1萋-尼氏(Z-N)抗酸染色法用萋-尼氏抗酸染液对痰涂片进行染色后,用普通光学显微镜镜检。在100倍油镜下进行观察,发现抗酸杆菌1~8 条/300视野者报告为阳性,全片300个视野未发现抗酸杆菌者报告为阴性。平均每张Z-N染色痰涂片阅片时间为4.4min。袁薇等[6]对658份门诊病人痰标本进行检测,Z-N染色阳性319份,涂片阳性率为48%。国外有文献报道[7]抗酸染色阳性率仅占0%~44%。因该法具有操作简单、检测迅速、价格低廉、特异度高等优点,故成为结核病实验室、特别是低收入且结核病高负担国家的实验室最广泛使用的主要诊断技术之一。
1.1.2荧光染色镜检法其原理为:使用荧光染料对抗酸杆菌进行染色,染色后使用特定波段的光束进行照射,与菌体结合的染料可被激发后产生荧光亮点。常先用20倍物镜对痰涂片进行镜检,发现可疑的荧光杆状物质后,再使用40倍物镜确认,只要求观察50个视野即可。读片时间为1~3min,在阴性结果的玻片上具有明显优势。国外有文献报道[8] ......
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