张运津，章桂娇，徐青青，吴虹，葛秀华，钟小兰

    (南昌三三四医院肾内科，江西 南昌330024)

    ·论著·

    miRNA - 374a在狼疮肾炎患者血清中的表达及其意义

    张运津，章桂娇，徐青青，吴虹，葛秀华，钟小兰

    (南昌三三四医院肾内科，江西南昌330024)

    摘要：目的探讨狼疮肾炎患者血清miRNA-374a的表达情况及其意义。方法运用TargetScan靶基因预测分析软件等生物信息学方法，预测miRNA-374a靶基因并进行分析；采用qRT-PCR方法检测miRNA-374a、MCP-1在狼疮肾炎患者血清和健康对照组血清的表达变化，并分析其与临床参数的关系。结果生物信息学分析显示MCP-1为狼疮肾炎的靶基因；与健康对照组相比，miRNA-374a在狼疮肾炎患者血清低表达(P0.05)，与临床分期有关(P1 材料与方法

    1.1研究对象所有研究对象均为南昌三三四医院住院和门诊患者。LN诊断标准：确诊为系统性红斑狼疮的患者，具备下述4项标准中3项：⑴持续蛋白尿为2～4+；⑵血浆中白蛋白≤35g/L；⑶尿液中见红细胞、颗粒或蜡样管型；⑷尿液镜检红细胞5/HPF。排除标准：⑴除外各种混合性结缔组织病；⑵除外心、脑、肾、肝及造血系统等严重原发性疾病；⑶排除精神病、内分泌代谢病及妊娠期妇女。收集其血清标本共计18例，均为女性；年龄35～72岁，平均56.8岁；根据静止期和活动期分为两组：LN活动性肾损害组7例，LN非活动性肾损害组11例，另选15例健康体检的正常女性血清作为健康对照组。

    1.2主要仪器与试剂德国Biometra Tpersonal PCR仪，美国ABI实时定量PCR仪step one plus。北京天根生化科技有限公司的miRcute miRNA提取分离试剂盒、miRcute miRNA cDNA合成试剂盒、miRcute miRNA荧光定量PCR试剂盒，Fermentas的逆转录试剂盒，北京全式金生物技术有限公司的2×EsyTaq PCR SuperMix试剂盒。

    1.3方法

    1.3.1qRT-PCR检测miRNA-374a、MCP-1的表达按试剂盒说明书操作。分别以U6和GAPDH为miRNA-374a和MCP-1的内参。miRNA-374a下游引物是试剂盒的通用引物，其余引物序列及PCR产物片断大小见表1。采用2-△△CT法进行数据分析。 ......