辛茶香，熊国亮，袁小兰，张周云，彭亦平

    (江西省胸科医院，江西 南昌330006)

    PCR反向点杂交技术快速鉴定BALF中分枝杆菌菌种的应用研究

    辛茶香，熊国亮，袁小兰，张周云，彭亦平

    (江西省胸科医院，江西 南昌330006)

    目的 探讨PCR-反向点杂交技术 (PCR-RDBHA)快速鉴定支气管肺泡灌洗液 (bronchoalveolar lavage fluid BALF)标本中分枝杆菌菌种的临床应用价值。方法对临床306例活动性肺结核患者、疑似非结核分枝杆菌感染肺病患者BALF标本采用PCR-反向点杂交技术和传统的改良罗氏培养法进行分枝杆菌菌种鉴定。结果306例BALF标本PCR反向点杂交技术检测出分枝杆菌127例，阳性率为41.5%(127/306)，其中结核分枝杆菌复合群(MTC)108例，占分枝杆菌的85. 0%(108/127)，非结核分枝杆菌(NTM)19例，占分枝杆菌的15.0%(19/127)。NTM中，6例脓肿分枝杆菌，10例胞内分枝杆菌，2例戈登分枝杆菌，1例瘰疬分枝杆菌；传统的改良罗氏培养法检测出分枝杆菌101例，阳性率33.0%(101/306)，经菌种的初步鉴定，其中MTC89例，占分枝杆菌的88.1%(89/101)，NTM12例，占分枝杆的11.9%(12/101)。结论PCR反向点杂交技术能够快速鉴定BALF中分枝杆菌菌种，该方法简便、结果准确，具有良好的临床应用价值。

    分枝杆菌；菌种鉴定；聚合酶链反应；反向点杂交

    分枝杆菌属包括结核分枝杆菌复合群(Mycobacterium tubetculosis comples，MTC)和非结核分枝杆菌(Nontuberculous mycobacterium，NTM)。近年来，由于HIV传播的日益猖獗，作为机会性感染之一，非结核分枝杆菌感染率不断在上升[1]。由于其对不同抗菌药物敏感性不同，这两类分枝杆菌感染后的治疗方案存在很大差别，因此二者的鉴别具有重要的临床意义[2]。目前，常规的分枝杆菌菌种鉴定需采用分枝杆菌培养分离株在进行抗结核药物的药敏试验时，将菌种接种于含对硝基苯甲酸(PNB)和噻吩-2-羧酸酰肼(TCH)鉴别培养基上，并辅以硝酸还原试验、烟酸试验和耐68℃热触酶试验，初步鉴定为结核分枝杆菌、牛分枝杆菌或NTM。该方法耗时较长，操作繁琐，污染大，缺乏可重复性，难以满足临床诊断和治疗的需要[3，4]。本研究以分枝杆菌rpoB基因为靶基因序列，应用聚合酶链反应反向点杂交技术快速鉴定患者BALF中分枝杆菌菌种 ......