朱义保，谢 彤，杨亮亮，万 磊

    (江西省妇幼保健院，江西南昌330006)

    HPV16病毒负荷量与宫颈病变及物理状态的研究

    朱义保，谢 彤，杨亮亮，万 磊

    (江西省妇幼保健院，江西南昌330006)

    目的研究HPV16病毒负荷量与宫颈病变及物理状态的关系，探讨反应宫颈病变的指标。方法收集感染HPV16患者的宫颈病变标本，对不同PML2d HPV-16质粒浓度的E2和E7基因进行定量PCR扩增，制作标准曲线，得出HPV16物理状态的临界值，描述标本HPV16的病毒负荷量，并根据临界值，分析HPV16病毒负荷量与宫颈病变及物理状态的关系。结果不同宫颈病变的HPV16中位数病毒负荷量随宫颈病变的级别升高而增加，但病毒负荷量差异无统计学意义(P=0. 22)，整合型HPV16在低级别宫颈病变也有较高分布，HPV16物理状态在不同宫颈的分布无统计学意义(P=0.55)，不同物理状态间的病毒负荷量差异亦不显著(P=0.34)。结论HPV16病毒负荷量与宫颈病变关系不明显，病毒整合是宫颈病变的早期事件，高的病毒负荷量不会导致整合增加。

    HPV16；病毒负荷量；宫颈病变；病毒整合

    宫颈癌是女性常见的恶性肿瘤。流行病学资料表明，患者感染高危型HPV并整合入基因组是宫颈癌发生的必要因素，因此高危性HPV的病毒负荷量及物理状态可能与宫颈病变的进展有关。有研究认为[1，2]，病毒负荷量高，免疫清除率低，病毒整合率高，容易导致宫颈病变，病毒负荷量与宫颈病变、病毒整合相关，但也有相反方向的报道[3]，认为病毒负荷量与宫颈病变、病毒整合无关。在本研究中，通过收集住院患者资料，对人乳头瘤病毒HPV16进行分析，探讨HPV16病毒负荷量与宫颈病变、物理状态的关系。

    1 资料与方法

    1.1 研究对象选取HPV分型检查HPV16阳性的患者，其中慢性宫颈炎21例，CINⅠ4例，CINⅡ22例，CINⅢ23例，宫颈癌28例。所有宫颈细胞标本用塑料毛刷取样。选取的这些患者均无与宫颈病变相关的疾病。

    1.2 主要试剂及仪器PML2d HPV-16质粒(P1203)由美国Addgene公司惠赠。DNA提取试剂盒、质粒提取试剂盒、PCR试剂、SuperReal PreMix Plus(SYBR Green)试剂等购自为北京天为时代公司，ABI 7300实时荧光定量基因扩增仪为美国Applied Biosystems产品。

    1.3 样本DNA提取从宫颈管采样，样品分两份，一份做人乳头瘤病毒分型检测 ......