唐永华，程建兵

    (1、深圳市光明新区人民医院，广东深圳518106；2、杭州艾迪康医学检验中心有限公司，浙江杭州310023)

    一种制作骨髓染色体G带的改良方法

    唐永华1，程建兵2

    (1、深圳市光明新区人民医院，广东深圳518106；2、杭州艾迪康医学检验中心有限公司，浙江杭州310023)

    目的建立一种具有分裂相多、分散度好、带纹清晰、长度适中等特征的骨髓染色体G带制作方法。方法在含9. 6%胎牛血清的RPMI1640培养基中加入一定量的人淋巴瘤细胞系培养物，接种骨髓细胞后培养24h，然后加入终浓度为30μg/ml的溴化乙锭和0.06μg/ml的秋水仙胺作用1h。结果通过方法改良，骨髓标本培养成功率约为传统方法的1.59倍，异常染色体检出率比传统方法提高了51%。结论改良后的方法可以制作出个数更多、分散度更加良好、带纹更加清晰、染色体更长的中期分裂相，因而异常染色体检出率更高，诊断结果更加可靠。

    骨髓染色体；G带；溴化乙锭

    近年来，随着分子生物学与细胞遗传学的发展，骨髓染色体核型分析在血液系统疾病的诊断、治疗和预后中发挥了越来越重要的作用。由于骨髓中含有大量的脂肪颗粒，且各种细胞系的细胞周期不固定，不统一，因而传统培养骨髓的方法(在含一定量胎牛血清的RPMI1640中接种骨髓细胞培养24h，终止培养前加入一定量的秋水仙素)制备出的染色体G带往往出现染色体分裂指数低，染色体短粗，分散度差等缺点，从而导致可分析的分裂相少，异常检出率低，诊断结果不可靠。因此，建立一种具有分裂相多、分散度好、带纹清晰、长度适中等特征的骨髓G带制作方法尤为重要。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 标本来源随机选取2000例来自全国各地多加医院(温州医科大学附属第一医院400例、台州医学院300例、德阳市人民医院300例、三明市第一医院200例、武汉市第一医院400例、安徽省第二人民医院400例)的骨髓标本进行实验。骨髓标本要求使用专用肝素钠抗凝管，无溶血、无凝血、未经过高温和冷冻且无污染的合格标本。

    1.1.2 主要试剂RPMI1640培养基、溴化乙锭、秋水仙胺、胰酶、Giemsa染液均购自Sigma公司，胎牛血清(FBS)购自Gibco公司，青霉素和链霉素的混合物购自Hyclone公司。

    1.2 方法

    1.2.1 改良骨髓培养基配制

    1.2.1.1 人淋巴瘤细胞培养物的制取利用含9.6% FBS的RPMI1640培养基 ......