肖芳，施勇，李健雄，龚甜，刘师文，熊英

    (江西省疾病预防控制中心，江西南昌330029)

    ·论著·

    基于SH片段的中国腮腺炎病毒疫苗株与野毒株鉴别方法的建立

    肖芳，施勇，李健雄，龚甜，刘师文，熊英

    (江西省疾病预防控制中心，江西南昌330029)

    目的研究建立一种简便快速的鉴别中国腮腺炎病毒疫苗株与野毒株方法。方法在已扩增出的小疏水蛋白基因(small hydrophobic gene)(SH基因)上，寻找能将中国腮腺炎病毒疫苗株区别于野毒株的限制性内切酶酶切位点，并对逆转录-聚合酶链反应(Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction，RT-PCR)的方法进行特异性实验证明。结果非腮腺病毒RT-PCR结果均未见阳性条带，说明RT-PCR方法特异。PCR产物经BclI酶切作用后，腮腺炎野毒株将会被酶切为170bp和340bp两个片段，而疫苗株则被酶切为270bp和240bp两个片段。结论新建立的RT-PCR-RFLP是一种快速、简便的鉴别中国腮腺炎病毒疫苗株与野毒株的方法。

    腮腺炎病毒；疫苗株；野毒株；逆转录聚合酶链反应；限制性片段长度多态性分析

    腮腺炎病毒是一种不分节段、单负链的RNA病毒，它属于副粘病毒科腮腺炎病毒属。腮腺炎病毒基因组结构为：3’N-P-M-F-SH-HN-L-5’，分别编码以下蛋白：核壳蛋白(N)，磷酸化蛋白(P)，膜蛋白(M)，融合蛋白(F)，小疏水蛋白(SH)，血凝素神经氨酸酶蛋白(HN)及大蛋白(L)。其中SH基因是整个腮腺炎病毒基因组中变异最大的部分，它常常被用作腮腺炎毒株型别及毒株间同源性分析[1]。2008年，我国将腮腺炎减毒活疫苗纳入国家免疫规划，18～24月龄接种1剂麻疹-腮腺炎-风疹联合减毒活疫苗或麻疹-腮腺炎联合减毒活疫苗。2009年江西省将腮腺炎纳入扩大免疫规划项目[2]。现阶段，中国使用的腮腺炎疫苗均为减毒活疫苗，且为A基因型，主要是S79株和Jeryl-lynn株[3]。目前，全球发现的腮腺炎病毒有12个基因型，但只有一个血清型[4]。通过血清学检测无法鉴定腮腺炎病毒的基因型别，也无法区分是疫苗株还是野毒株感染。江西省目前腮腺炎病毒流行株的基因型为F基因型[5]，这与中国目前的优势基因型是一致的[6～9]。大多数国家都是依靠测序后序列分析的方法来鉴定腮腺炎病毒的基因型别及区分疫苗株还是野毒株[10]。但序列分析的方法受条件限制很难广泛开展，因此建立一种快速简便易操作的鉴别腮腺炎疫苗株与野毒株的方法非常必要 ......