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编号:1451713
急性白血病患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞检测及其对细胞凋亡的作用
http://www.100md.com 2017年6月27日 实验与检验医学 2017年第3期
定量,1材料与方法,2结果,3讨论
     吴琼,王小中

    (南昌大学第二附属医院检验科,江西南昌330006)

    急性白血病患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞检测及其对细胞凋亡的作用

    吴琼,王小中

    (南昌大学第二附属医院检验科,江西南昌330006)

    目的研究CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞在急性白血病患者外周血中的检测,并探讨其对细胞凋亡的作用。方法将65例急性白血病患者(包括急性淋巴细胞性白血病33例和急性髓系白血病32例)分为未缓解组(28例)和缓解组(37例),25例健康志愿者作为对照组。根据是否合并感染又分为合并感染组(39例)和未合并感染组(26例)。采用细胞内染色的流式细胞术及荧光定量PCR的方法,分别在蛋白质和mRNA水平检测Foxp3表达,并与正常对照组进行比较。同时,利用荧光定量PCR的方法的检测凋亡相关基因Bcl-2、Bax、P53的表达。结果与正常对照相比,急性白血病患者(未缓解组和缓解组)外周血中CD4+CD25+Foxp3+比例明显提高,且治疗缓解后CD4+CD25+Foxp3+表达下调(P<0.05)。凋亡相关基因Bcl-2表达上调,Bax、P53表达下调。结论急性白血病患者外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞明显升高,并且,影响凋亡相关基因Bcl-2、Bax、P53的表达,提示CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞可能通过细胞凋亡信号通路影响急性白血病的发展。

    急性白血病;流式细胞术;CD4+CD25+Foxp3+;调节性T细胞;细胞凋亡

    急性白血病是一类造血干细胞异常的克隆性恶性疾病,是常见的血液恶性肿瘤,多种免疫机制参与白血病的发生发展过程。在抗肿瘤免疫效应中,细胞免疫比体液免疫起着更为重要的作用[1]。CD4+CD25+调节性T细胞是(T regulatory cells, Treg)具有抑制自身免疫反应、阻止损伤性免疫病理发生和维持机体免疫平衡作用的T细胞亚群,具有抑制细胞免疫,并诱导肿瘤免疫逃逸作用[2]。转录因子FoxP3是Treg的特异表面标志,参与维持其发育和功能,其表达水平能更为精确地反映CD4+CD25+Treg的活性[3,4],是Treg检测的关键标志之一[5]。本研究采用流式细胞术(flowcytometry,FCM)进行细胞内染色,检测细胞核内表达的Foxp3分子,并结合PCR反应的高度特异性和灵敏性进行共同检测,同时,对细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax、P53的mRNA采用PCR方法进行检测,旨在研究急性白血病患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg的表达情况 ......

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