黄雪琼，吴普昭，黄诚记

    (广州市番禺区中心医院检验科，广东 广州 511400)

    丙型肝炎病毒是一种经血液传播引起慢性肝脏疾病的RNA病毒，其核酸是单股、线性、正链RNA。由于HCV-RNA复制所依赖的聚合酶缺乏校正功能，HCV基因组呈现高度特异性[1]。根据不同区域的基因序列变异情况，HCV分为6个基因型和80多种基因亚型。不同HCV基因型感染者的临床表现、肝病严重程度及慢性化病程进展均有差异，抗病毒治疗的效果也不同[2]，近年来的研究表明，HCV的基因型与丙型肝炎的治疗方案及治疗周期关系密切[3，4]。本文通过统计分析番禺地区丙型肝炎患者病毒基因型及基因型与病毒载量的相关性，以了解本地区丙型肝炎患者的病毒基因型构成状况及为个体化抗病毒治疗方案提供参考依据。

    1 对象与方法

    1.1 研究对象 2016年在广州市番禺区中心医院门诊和住院所有HCV-RNA阳性的丙型肝炎患者，共收集125例病例。

    1.2 标本采集 空腹静脉采血3ml，3000r/min离心5min；吸取上层血清立即检测或置于1.5ml经高温高压灭菌处理的EP管内，-70℃保存待测。

    1.3 仪器和试剂 ABI 7500 Real Time PCR system实时荧光PCR检测仪，YN-H16分子杂交仪、GELDOCXR+凝胶成像分析仪。丙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒和丙型肝炎病毒基因分型检测试剂盒，均购于中山大学达安基因股份有限公司。

    1.4 血清HCV-RNA定量检测 严格按照丙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒操作说明书和实验室操作规程对血清标本进行HCV-RNA定量检测。

    1.5 HCV 基因分型检测

    1.5.1 HCV-RNA提取 严格按照丙型肝炎病毒基因分型核酸提取试剂盒操作说明书提取血清标本HCV-RNA，并对已提取的病毒核酸溶液立即进行扩增。

    1.5.2 RT-PCR扩增 取PCR反应管，加入反应试剂和30ul已提取的病毒核酸溶液 ......