优化冰冻血小板制备条件的初步研究
絮状物,回收率,1材料与方法,2结果,3讨论
孙瑜,翁美芝,熊莉,徐翠玲,付文霞,袁虾,樊立荣,吴红,李国良(江西省血液中心,江西 南昌 330000)
对因血小板缺失导致的出血性疾病,输注血小板是特异性的治疗方法[1-4],但应急情况下新鲜血小板来源不足,且保存条件有利于细菌生长,直接限制了临床应用。为更好的满足临床需求,各国均在研究延长血小板保存期限的方法,我国1989年便有文献[5]报导应用DMSO保存浓缩血小板。但冰冻血小板的制备操作过程严格,贮存条件高,解冻后血小板容易出现絮状物,影响质量,甚至报废,为提高冰冻血小板的保存质量,保护受血者利益,我中心根据相关文献尝试使用不同浓度的二甲基亚砜(dimethylsulphoxide,DMSO),选择不同条件制备冰冻血小板,并选择不同温度融化冰冻血小板,以期寻找出最适合制备冰冻血小板的方法。现汇报如下:
1 材料与方法
1.1 献血者选择 随机选择我中心无偿献血者,年龄(18~47周岁),男18例,女30例,遵循知情同意原则抽取本人全血400ml,制备手工血小板。
1.2 仪器与设备 赫立氏6000i离心机 (美国热电公司),血小板振荡仪(苏州医用仪器厂),-80℃深低温冰箱,(三洋),速冻机(多美达),循环水浴箱(潍坊普华),全自动血细胞计数仪(希森美康)
1.3 试剂 DMSO(Lot:USP4F1S,德国 WAK),生理盐水(Lot:160302 31A,上海输血技术有限公司)
1.4 方法
1.4.1 手工血小板的制备 使用富浆法制备手工血小板,离心程序为 1200g×9min,22℃;3000g×4min,22℃,保留60g终产品置于血小板保存袋中,并将每袋血小板以无菌接管机分成20gX2袋 ......
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