闵文光，余慧宏，魏建萍，涂智杰，吴建英，宋建新

    (景德镇市疾病预防控制中心，江西 景德镇 333000)

    微生物引起的食源性疾病中，志贺菌，大肠埃希菌O157与副溶血性弧菌引起的食源性疾病占据了大多数。传统检测方法的操作步骤过于繁琐，工作量大，检测周期长，不能及时为食源性疾病爆发和食物中毒提供有效的线索[5]。本研究旨在建立一种快速同时检测三种病原菌的多重PCR方法。有文献报道，志贺菌侵袭性质粒抗原H的IpaH基因[1]、副溶血性弧菌t1基因[2]，大肠埃希菌O157的eaeA基因[3，4]均具有很高的特异性，在这些文献研究中已得到验证。通过对三种致病菌的基因进行分析，设计出各自特异性PCR引物，通过对病原学标本的合理处理，PCR反应条件的摸索，能同时对三种病原菌进行PCR扩增。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 菌株实验所用菌株共8株，分别为志贺菌(ATCC10412)、大肠埃希菌 O157(ATCC43888)、肠道致病性大肠埃希氏菌(ATCC11775)、产肠毒素性大肠埃希菌 (ATCC35401)、 金黄色葡萄球菌(ATCC29213)、单核细胞增生李斯特菌(CMCC54004)、蜡样芽孢杆菌(CMCC(B)63303)、副溶血性弧菌(ATCC17802)。所有菌株均为本实验室保藏菌株。

    1.1.2 培养基LB培养液组成成份 胰蛋白胨10g/L、NaCl 10g/L、酵母提取物 5g/L ......