贺素锦

    (中国平煤神马集团职业病防治院 呼吸内科，河南 平顶山467000)

    支气管哮喘是由多种细胞和细胞组分参与的以气道慢性炎症为主要病理机制的呼吸道疾患，常表现为咳嗽、反复或持续性喘息、胸闷气急，急性发作时可并发猝死、严重肺部感染、呼吸衰竭等[1，2]。 既往临床研究显示[3，4]，气道慢性炎症发生时使支配肾上腺髓质的交感神经兴奋而释放乙酰胆碱(acetylcholine，ACh)，肾上腺髓质嗜铬细胞(adrenM medullary chromafiin cells，AMCCs)的烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors，nAChRs)被激活，Ca2+经细胞膜上活化的钙离子通道进入细胞内，使细胞内Ca2+浓度升高，促进去甲肾上腺素(noradrenaline，NA)、多巴胺(dopamine，DA)、肾上腺素(adrenaline，Adr)释放。Yu M 等[5]研究发现支气管哮喘患者肾上腺髓质nAChRs构成与健康对照组比较发生显著性变化，他们推测哮喘患者nAChRs的 α3、α4、α7、β4 亚基构成的变化可能与 AMCCs释放Adr有密切关系。为进一步证实Yu M等[5]的推测，本研究对172只小鼠进行体内实验及体外实验，旨在探讨nAChRs对急性支气管哮喘小鼠肾上腺激素分泌的影响，现报告如下。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物与分组 选用购于上海斯莱克实验动物有限责任公司 (许可证号：SO XK(沪)2007-0005)的7周龄健康SPF级C57B/L雄性小鼠172只，单只体质量25～30g。小鼠饲养于动物实验室独立通气笼中，每笼5只，实验室室温维持在25℃，湿度维持在50%，所有小鼠光照12h/d。采用同种无菌饲料对所有小鼠进行投喂，饮水自由，术前禁食12h。采用随机数字表法将172只小鼠分为哮喘组(n=86)与对照组(n=86)，两组小鼠一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。本研究上报动物保护协会及医学伦理委员会并获得批准。

    1.2 实验药物与试剂 氢氧化铝凝胶佐剂购于北京来福赛思科技有限公司；卵清白蛋白(OVA)购于上海斯信生物科技有限公司；ELISA试剂盒购于上海恒远生物科技有限公司；双蒸水购于上海乔羽生物科技有限公司；甲基牛扁碱购于上海起发实验试剂有限公司；免疫荧光染色试剂盒购于北京百奥莱博科技有限公司；碳酸盐包被缓冲液购于美国Agdia公司；酶标板购于上海晶安生物科技有限公司；Eppendorf移液枪购于北京卓信伟业科技有限公司；牛血清白蛋白购于上海恒远生物科技有限公司；98%浓硫酸购于上海皖科电子科技有限公司；苏木素购于北京酷来搏科技有限公司；1%盐酸溶液购于上海铭博生物科技有限公司；伊红购于上海远慕生物科技有限公司；梯度酒精购于北京雅康博生物科技有限公司；中性树胶购于成都麦卡希化工有限公司；10%甲醛溶液购于杭州新乔生物科技有限公司；二甲苯购于上海瑞剑生物科技有限公司 ......