温晓静，钟磊，钟宏文

    (1.赣州市赣县区人民医院检验科，江西 赣州341100；2.赣州市人民医院检验科，江西 赣州 341000)

    2型糖尿病 (T2DM)有更明显的遗传基础，发病多见于成年人而非青少年、发病机制主要为胰岛素抵抗、胰岛素分泌缺陷和非胰岛β细胞自身免疫破坏。虽2型糖尿病具有遗传异质性，但大多数伴2型糖尿病和空腹高血糖的患者特征性表现为胰岛素抵抗、胰岛素分泌障碍和肝脏葡萄糖产生增加等[1-4]。miRNA作为天然的基因调控因子在肿瘤发生、血管生成、细胞分化、胚胎发育等许多重要的病理生理过程中发挥着重要的调控作用[4-5]。大量研究表明异常表达的miRNA与许多疾病的发生发展存在潜在的联系，miRNA有可能运用于疾病的早期诊断及治疗靶点[6-7]。miRNA-375是胰岛组织特异表达的miRNA，能影响胰岛β细胞的胰岛生物合成素的分泌过程[8]。本研究选取初诊的2型糖尿病患者和健康对照者外周抗凝全血，检测miRNA-375的表达情况，并在体外培养细胞，进一步探讨其表达调控机制，期盼为揭示2型糖尿病的发病机制提供新线索。

    1 材料与方法

    1.1 研究对象 选择2015年1月-2016年12月在我院内科确诊为T2DM的患者为研究对象。收集全血标本共计20例。其中男性12例，女性8例；年龄38～76岁，平均52.4岁；对照组为20例健康体检者。标本收集均通过医院伦理委员会批准并签署了知情同意书。

    1.2 主要试剂和仪器 Ficoll分离液购自广州蓝吉生物技术有限公司，miRcute miRNA提取分离试剂盒、miRcute miRNA荧光定量检测试剂盒均购自北京天根生化科技有限公司、miRcute miRNA cDNA第一链合成试剂盒、DMEM/F12培养基购自Hyclone公司、RIPA细胞裂解液北京塞默飞生物科技有限公司 、BCA蛋白浓度测定试剂盒购自北京博奥森生物技术有限公司、实时定量PCR仪购自美国ABI公司 ......