环介导恒温扩增法快速检测曲霉菌的研究
敏感性,特异性,1材料与方法,2结果,3讨论
章白苓 ,徐轶 ,杭亚平 ,张楠 ,邹珊(1.南昌大学第二附属医院检验科,江西 南昌 330006;2.江西省人民医院,江西 南昌 330006)
曲霉菌属 (Aspergillus)是侵袭性曲霉菌病等的严重条件致病菌,部分患者病死率高达90%[1,2],目前,临床曲霉菌感染均依据临床症状,培养分离等方法。近年来PCR技术被应用于曲霉菌的鉴定,但需要核酸扩增仪等昂贵仪器和专业操作人员,检测时间还是比较长,并且反应过程容易受污染的影响。本研究采用环介导恒温扩增 (Loop-mediated Isothermal Amplification LAMP)技术,设计 2对引物来识别目标基因的6个不同区域,建立一种快速,简便,经济检测曲霉菌的方法,通过肉眼直接观察颜色变化来判断结果,并初步应用于临床。现报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 临床标本和标准菌株来源 临床标本(痰液)来自南昌大学第二附属医院临床微生物室,烟曲霉ATCC96918、黄曲霉 ATCC11492,来自上海复祥生物科技有限公司,白念珠菌ATCC 90029、热带念珠菌 ATCC66029、大肠埃希菌 ATCC 25922、金黄色葡萄球菌ATCC25923、铜绿假单胞菌ATCC27853、肺炎链球菌ATCC49619为本室保存 ......
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