刘晓庆,李健雄，刘师文，肖芳，施勇，熊英

    (江西省疾病预防控制中心，江西 南昌 330029)

    消灭脊髓灰质炎的最终目的是阻断脊髓灰质炎野病毒的传播,目前这一工作已取得了重大进展,并且Ⅱ型脊髓灰质炎病毒已从自然界消失[1]，事实上导致15岁以下的儿童出现麻痹的，除了脊髓灰质炎病毒外，还有许多非脊灰肠道病毒。近些年来，随着脊灰病毒的消灭，由非脊灰肠道病毒引起的急性弛缓性麻痹越来越吸引人们的眼球。为了解NPEV的分布特征和流行病学规律,迫切需要对NPEV中的肠道病毒进行型别鉴定。近年来，国际上建立了应用分子生物学方法对肠道病毒进行分型鉴定的方法,为探索江西省急性弛缓性麻痹病例中的NPEV的感染情况,本研究对2013年-2017年从急性弛缓性麻痹(AFP)病例中分离到的NPEV进行分子定型，探讨其型别分布情况以及流行病学规律。

    1 材料

    1.1 数据资料来源 AFP病例资料来源于AFP病例监测信息管理系统数据库、江西省疾病预防控制中心脊灰实验室监测数据。

    1.2 粪便标本处理 来源于2013年-2017年江西省AFP病例监测系统报告的AFP病例(15岁以下儿童),绝大部分病例按照WHO的要求采集双份粪便，所有粪便标本按照WHO《脊髓灰质炎病毒实验室操作手册》处理后接种于WHO推荐的RD和L20B细胞[2]，出现病变后，采用实时定量PCR(real-time PCR)方法进行脊灰病毒型别鉴定。本文对历年来本实验室保存的存的脊髓灰质炎病毒株进行病毒型别鉴定。

    2 方法

    2.1 病毒核酸的提取及引物设计 取病毒培养液200μl，按 QIAamp Viral RNA Mini kit(试剂生产批号：130188374)试剂5滴说明书操作 ......