廖威，方丽娟，邓旭怡，罗小琴，雷春洪，王刚

    (江西迪安华星医学检验实验室，江西 南昌 330096)

    检测系统的分析性能验证是临床检验质量管理 的 重 要 内 容 。 CNAS-CL02：2012 (ISO15189：2012IDT)[1]指出，在常规应用前，应由实验室对未加修改而使用的已确认的检验程序进行独立验证。验证过程证实的检验程序的性能指标，应与检验结果的预期用途相关。CNAS-CL02-A009[2]指出，定量检测方法和程序的分析性能验证内容至少包括精密度、正确度、线性范围、抗干扰能力等验证。正常健康人体内不含HCV-RNA，所以检出限的验证也是重要的验证环节。本实验室HCV-RNA定量检测系统使用磁珠法提取核酸,提取效率较柱抽提法高[3]。由于PCR检测项目相对其他专业的检测项目来说，验证的标本获取相对困难，且验证内容和验证方法不完全一致。本文以CNAS文件和中华人民共和国卫生行业标准颁布的系列文件为依据,对新使用的HCV-RNA定量检测系统进行性能验证，评估并分析其临床应用价值。现报告如下。

    1 材料与方法

    1.1 标本来源 HCV-RNA低值S5和高值S3标准物质来自北京康彻斯坦生物技术有限公司；2017年和2018年卫生部临床检验中心室间质评标本，共 10 份,编号为：201721～201725、201811～201815；HCV-RNA高值阳性血清为本实验室收集的高浓度临床阳性标本；HCV-RNA阴性血清为本实验室收集的已证实肝功能、乙肝两对半、丙肝抗体和HCV RNA全为阴性的体检标本。所有标本于-70℃冰箱保存。

    1.2 仪器与试剂 美国ABI7500荧光定量PCR仪,湖南圣湘生物科技有限公司丙型肝炎病毒核酸定量检测试剂盒(PCR-荧光探针法),批号2018001。

    1.3 实验方法

    1.3.1 精密度验证 参照WS/T 492-2016[4]文件。将HCV-RNA高浓度阳性标本进行10倍梯度稀释至浓度范围 为106 IU/ml和103 IU/ml的高低两个浓度水平，每天分析一个批次，每个水平重复测定4次，连续测定5d，每个水平累计得到20个数据。计算批内精密度(CV批内)和总精密度(CV批总)。

    1.3.2 标本携带污染验证 使用HCV-RNA高浓度阳性标本44例、阴性标本44例，交叉排列。同时提取、扩增，验证检测系统抗污染能力。要求阴性血清检测结果仍为阴性，则验证通过。

    1.3.3 正确度验证 检测卫生部临床检验中心2017年和2018年全国室间质评活动的标本10个(编号为：201721～201725；201811～201815),按照国家卫生部临床检验中心的判断标准,要求结果落在靶值±0.4 Log值为符合要求,10个标本至少8个符合要求为验证通过 ......