何鑫 ，荣昊 ，任伟宏 ，李延卿 ，李文博 ，冯倩 ，冯慧洁 ，刘朝阳

    (1.郑州大学第五附属医院检验科，河南 郑州 450000；2.河南中医药大学第一附属医院检验科，河南 郑州 450000；3.河南中医药大学，河南 郑州 450000)

    肺癌是全球癌症相关死亡的主要原因,严重危害人类公共卫生健康[1]。尽管当今社会诊断技术日益进步、新型药物不断研发，但肺癌的总体生存率仍然不尽人意[2,3]。2012年全球肺癌死亡人数高达1.59亿，占所有癌症死亡人数的19.4%。非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)是肺癌的主要类型，占肺癌总发病率的85%。迄今为止，绝大多数NSCLC患者在初诊时就已经处于中晚期，而现有的治疗往往只是暂时控制症状，5年生存率仅为15.9%[4]。然而，如果NSCLC患者能够做到早发现、早治疗,其生存质量以及生存周期都会得到显著改善，因此，基于外周血的生物诊断标志物正在变得越来越有前景。

    外泌体是一种直径范围在30～100nm之间的极微小的纳米级囊泡结构。在体内，外泌体存在于大多数体液中，包括脑脊液、母乳、血液、尿液、唾液、羊水和胸腹水积液。在外周血中，外泌体浓度约为3×106/μl。外泌体从多种细胞中排出，包括红细胞、血小板、淋巴细胞、树突细胞和癌细胞，但癌细胞具有高度活跃的生物学活性，因此其外泌体分泌量远超其它正常细胞。某些研究已经证明外泌体可以与受体细胞细胞膜融合，从而将外泌体内容物插入受体细胞。在外泌体的分泌过程中,母体细胞的类型和生理病理状态决定了外泌体的组成和结构[5]。外泌体是多种生物分子的载体，包括蛋白质、肽、脂质、DNA、mRNA和microRNA。尤其重要的是，mRNA和microRNA等基因材料作为外泌体内容物可被翻译并调节受体或靶细胞中的基因表达[6]。现研究表明，microRNA通过调节基因表达的转录过程在许多慢性疾病以及癌症的发病机制中起着关键作用[7]。人体内的循环microRNA之所以可以在外周血中稳定存在，是因为被微泡、外泌体等囊泡包裹，或者与蛋白质结合形成复合物，免于受到血液中核糖核酸酶(Rnase)的降解以及温度、酸碱度等不利因素的干扰[8-10]。正是因为NSCLC患者外周血中含有大量肺癌细胞来源的外泌体,本研究通过检测外泌体中的特异性microRNA来对NSCLC进行早期预测。

    EGFR基因是ERBB家族中的一员，对细胞的生长、增殖和分化等生理过程发挥重要作用[11]。如果EGFR基因过表达或者发生突变,将导致信号传导通路的异常 ......